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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-08-26 18:08:32
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你说的问题很模糊,不长单克隆原因很多,比如感受太细胞有问题,连接有问题等等!楼主最好做个对照,用质粒验证感受态细胞有问题没有,如果转质粒长出菌了那么很有可能是你连接出问题了!如果质粒都没有出来说明细胞出问题了,那只能重新做细胞.连接问题就分很多种了,可能是你目的片断双梅切不完全,也可能是你连接体系出问题,比如连接酶失活了,目标片断与载体的摩尔比相差太大(一般载体与目的片断为1:3-1:10),连接温度一般16度过夜就可以了! |
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