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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » 小鼠下丘脑和垂体的取出方法。
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running113

木虫 (著名写手)

[交流] 小鼠下丘脑和垂体的取出方法。

最近在考虑制作小鼠下丘脑和垂体的切片。
无奈查找的相关资料太少，不知从何下手。
昨天试着取了几个，发现一些问题需要解决。
还请坛内各路高手帮忙解决。
１：脑松脆，切开后，找不到下丘脑和垂体的具体位置，求小鼠脑部高清图或相关资料信息。
２：切开颅骨后，组织马上粘在一起，难以区分脑的不同部位，不知如何解决。
３：组织切片是用冰冻切片好，还是石蜡切片好。主要是ＨＥ染色用。
还请解答，在此先谢过。
小鼠下丘脑和垂体的取出方法。
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SCI我来了！！！
1楼 2014-08-25 10:25:25
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running113

木虫 (著名写手)
这个话题是不是有点冷了。
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SCI我来了！！！
2楼2014-08-25 17:05:31
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q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
running113: 金币+2, 很好的建议。灌注有什么具体操作方法么？特别是对脑部。 2014-08-26 09:22:08
1、如果脑过于松软，可以放于-20度冰箱冻几分钟，这样 就能变硬，会比较好切而不变形。
2、你是取材的时候用边过猛吧，这样容易弄碎脑。还有一个方法，你可以用福尔马林灌注，灌注后脑会变得比较硬且干净。
3、做HE，当然用石蜡切片比较好，石蜡切片能长时间保存，且细胞形态比冰冻好。
小鼠下丘脑和垂体的取出方法。-1
34102663.snap.jpg
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3楼2014-08-25 21:46:36
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running113

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by q317476148 at 2014-08-25 21:46:36
1、如果脑过于松软，可以放于-20度冰箱冻几分钟，这样 就能变硬，会比较好切而不变形。
2、你是取材的时候用边过猛吧，这样容易弄碎脑。还有一个方法，你可以用福尔马林灌注，灌注后脑会变得比较硬且干净。
3、做 ...

1:灌注有什么具体的操作方法么，特别是对小鼠而言。
2:-20度冰冻的应该是尸体吧？！
3:我做的石蜡切片效果一直不好，郁闷中...。不知有何好的建议。
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SCI我来了！！！
4楼2014-08-26 09:24:07
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q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
running113: 金币+7, 都给你吧！呵呵，谢谢！ 2014-08-26 11:28:51
引用回帖:
4楼: Originally posted by running113 at 2014-08-26 09:24:07
1:灌注有什么具体的操作方法么，特别是对小鼠而言。
2:-20度冰冻的应该是尸体吧？！
3:我做的石蜡切片效果一直不好，郁闷中...。不知有何好的建议。...

真小气，就给 俩币币。很多人做脑缺血取脑时就采用福尔马林灌 注。 灌注从心脏灌。
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5楼2014-08-26 11:11:26
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running113

木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by q317476148 at 2014-08-26 11:11:26
真小气，就给 俩币币。很多人做脑缺血取脑时就采用福尔马林灌 注。 灌注从心脏灌。...

竟然还余一个。

如有需要可再追加。
呵呵。
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SCI我来了！！！
6楼2014-08-26 11:29:47
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q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
running113: 金币+1, 这个主意不错哦。 2014-08-26 15:47:10
引用回帖:
6楼: Originally posted by running113 at 2014-08-26 11:29:47
竟然还余一个。

如有需要可再追加。
呵呵。...

石蜡切片效果哪里不好，很多步骤都可能影响后面的效果。不知道你不好是怎么个不好法，  小鼠灌注的确没大鼠容易，那你就地直接把脑取下来，固定好后再切你需要的部位。
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7楼2014-08-26 15:12:39
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running113

木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by q317476148 at 2014-08-26 15:12:39
石蜡切片效果哪里不好，很多步骤都可能影响后面的效果。不知道你不好是怎么个不好法，  小鼠灌注的确没大鼠容易，那你就地直接把脑取下来，固定好后再切你需要的部位。...

主要是以前做别的石蜡切片，总是切的不理想。
经过数月鏖战，最终放弃石蜡切片，改用冰冻了。
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SCI我来了！！！
8楼2014-08-26 15:48:06
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lalalalululu

银虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
running113: 金币+2, 继续奖励！呵呵。 2014-09-18 08:01:40
running113: 金币+1 2014-11-19 11:02:22
问题解决了？我也要做，但没实践过，学经验来的。这是我查的灌注方法
1) 用4%水合氯醛将动物进行腹腔麻醉后，打开胸腔，经左心室插管到主动脉，剪开右心耳；
2) 灌注生理盐水50 mL冲洗血液，再灌注4%多聚甲醛溶液100mL
3) 灌注完成后仔细分离取出大脑组织，
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9楼2014-09-17 15:46:41
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running113

木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by lalalalululu at 2014-09-17 15:46:41
问题解决了？我也要做，但没实践过，学经验来的。这是我查的灌注方法
1) 用4%水合氯醛将动物进行腹腔麻醉后，打开胸腔，经左心室插管到主动脉，剪开右心耳；
2) 灌注生理盐水50 mL冲洗血液，再灌注4%多聚甲醛溶液 ...

不错哦！谢谢

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SCI我来了！！！
10楼2014-09-18 07:59:34
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