24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2324  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

LTengEr

新虫 (初入文坛)

[求助] southern blot 点杂交一直不出现显色点 已有1人参与

探针浓度为25 ng/ml。膜是尼龙膜。
预杂交液:5X SSC,0.02%SDS,1%Blocking Reagent预杂交温度65°,4小时
在杂交袋里65°恒温水浴锅里杂交过夜
试剂盒是BOSTER DIG Random Labeling and Detection Kit I(POD)
(for color detection with DAB)
在显色的时候尼龙膜上背景有土黄的颜色,然后烘烤干燥后颜色会明显变淡。
做了很多次一直没有结果。后来又重新测了各瓶溶液的pH,发现pH都不对了,重新调了pH再做还是不行。
求大神帮助。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jackyoung

新虫 (正式写手)

应该是显色剂有问题了吧,拿试剂盒里带的control做个点杂看一看,至少要保证抗体到显色剂都没有问题再说。

发自小木虫Android客户端
CestLaVie
4楼2016-07-05 08:34:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

LTengEr

新虫 (初入文坛)

应该是检测探针灵敏度的结果,2号的是结果吗?还是只是背景
我的背景为什么这么深是哪里有问题吗?哪里应该改进?
求大神分析一下
southern blot 点杂交一直不出现显色点
1.jpg


southern blot 点杂交一直不出现显色点-1
1_副本.jpg


southern blot 点杂交一直不出现显色点-2
2.jpg

2楼2014-08-24 21:19:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vltaober

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

http://www.ebioq.com/openlab/43/0 这个里面有关于southern blot的技术资料问答,可以去逛逛,如果实在有问题还可以咨询他们的,我们也在这做过,嗯,棒棒的。
3楼2016-07-04 16:30:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ghs25372216

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

5楼2016-08-10 21:07:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 307求调剂 +15 超级伊昂大王 2026-03-24 16/800 2026-03-30 16:18 by sophie2180
[考研] 329求调剂,一志愿西北工业大学,材料工程(085601) +5 小小机灵虫 2026-03-29 11/550 2026-03-30 15:02 by Wang200018
[考研] 071010 323 分求调剂 +3 Baekzhy 2026-03-27 3/150 2026-03-30 14:24 by andresqi
[考研] 287求调剂 +11 land xuxu 2026-03-26 11/550 2026-03-30 13:17 by 白云朵朵飞
[考研] 283求调剂(080500) +14 A child 2026-03-27 14/700 2026-03-30 12:06 by 探123
[考研] 材料工程专硕求调剂 +6 hyl3153942 2026-03-29 6/300 2026-03-30 12:04 by 1018329917
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +4 邱gl 2026-03-26 7/350 2026-03-30 08:39 by 探123
[考研] 085600 286分 材料求调剂 +10 麻辣鱿鱼 2026-03-27 11/550 2026-03-29 21:52 by nanaliuyun
[考研] 材料科学与工程求调剂 +6 深V宿舍吧 2026-03-29 6/300 2026-03-29 20:51 by 唐沐儿
[考研] 求调剂 +7 争取九点睡 2026-03-28 8/400 2026-03-28 21:07 by 争取九点睡
[考研] 340求调剂 +5 jhx777 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:18 by fmesaito
[考研] 315分求调剂 +7 26考研上岸版26 2026-03-26 7/350 2026-03-28 04:05 by fmesaito
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +5 Ong3 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:24 by goldfish51
[考研] 314求调剂 +3 溪云珂 2026-03-26 3/150 2026-03-27 11:20 by sanrepian
[论文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3 Russ_ss 2026-03-25 5/250 2026-03-27 10:49 by 陆小果画大饼
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
[考研] 296求调剂 +4 汪!?! 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪!?!
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见