24小时热门版块排行榜    

查看: 2488  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

LTengEr

新虫 (初入文坛)

[求助] southern blot 点杂交一直不出现显色点 已有1人参与

探针浓度为25 ng/ml。膜是尼龙膜。
预杂交液:5X SSC,0.02%SDS,1%Blocking Reagent预杂交温度65°,4小时
在杂交袋里65°恒温水浴锅里杂交过夜
试剂盒是BOSTER DIG Random Labeling and Detection Kit I(POD)
(for color detection with DAB)
在显色的时候尼龙膜上背景有土黄的颜色,然后烘烤干燥后颜色会明显变淡。
做了很多次一直没有结果。后来又重新测了各瓶溶液的pH,发现pH都不对了,重新调了pH再做还是不行。
求大神帮助。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vltaober

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

http://www.ebioq.com/openlab/43/0 这个里面有关于southern blot的技术资料问答,可以去逛逛,如果实在有问题还可以咨询他们的,我们也在这做过,嗯,棒棒的。
3楼2016-07-04 16:30:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

LTengEr

新虫 (初入文坛)

应该是检测探针灵敏度的结果,2号的是结果吗?还是只是背景
我的背景为什么这么深是哪里有问题吗?哪里应该改进?
求大神分析一下
southern blot 点杂交一直不出现显色点
1.jpg


southern blot 点杂交一直不出现显色点-1
1_副本.jpg


southern blot 点杂交一直不出现显色点-2
2.jpg

2楼2014-08-24 21:19:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jackyoung

新虫 (正式写手)

应该是显色剂有问题了吧,拿试剂盒里带的control做个点杂看一看,至少要保证抗体到显色剂都没有问题再说。

发自小木虫Android客户端
CestLaVie
4楼2016-07-05 08:34:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ghs25372216

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

5楼2016-08-10 21:07:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +7 chengyan1220 2026-08-21 8/400 2026-08-21 15:19 by chengyan1220
[基金申请] 让我中一个面上吧! +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +15 医学老男孩 2026-08-20 18/900 2026-08-21 13:46 by 医学老男孩
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 什么时候开奖? +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +15 archvillain 2026-08-15 27/1350 2026-08-21 11:32 by tim76
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
信息提示
请填处理意见