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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 梯度洗脱 300nm 乙腈-0.2%甲酸流动相 色谱甲醇出峰是怎么回事呢
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tongyunming

新虫 (小有名气)

[求助] 梯度洗脱 300nm 乙腈-0.2%甲酸流动相 色谱甲醇出峰是怎么回事呢 已有5人参与

各位大侠：
       我用HPLC梯度洗脱做三个标准品的混标（色谱甲醇做溶剂），发现不止三个峰。后用甲醇溶剂跑一针，竟出现四个峰，进两针都是如此。附件图片就是甲醇出的峰，最高的有100多mV。请高手指点，可能是什么原因呢？

梯度洗脱 300nm 乙腈-0.2%甲酸流动相 色谱甲醇出峰是怎么回事呢
IMG_20140820_152147.jpg
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1楼 2014-08-21 09:54:23
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tongyunming

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by lygbxq at 2014-08-22 12:19:11
你把进混合标准品的图谱与进纯甲醇的图谱合并发来看看。
如果确定不是流动相和柱子的问题，有可能是你进样针或者是六通阀污染了。
可以尝试不进样，直接跑梯度试试看。

两张图谱能对上，都有这几个大峰。
打算试试不进样，直接跑梯度，谢谢了！
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16楼2014-08-22 17:05:07
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tongyunming

新虫 (小有名气)
★
wangkaibo123: 金币+1, 鼓励积极交流经验 3q 2014-08-21 19:51:23
流动相的梯度程序为：
0~45min，乙腈11~28；45~55min，乙腈28~80；55~90min，乙腈80~80
流速4ml/min,进样量5ul
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2楼2014-08-21 09:57:55
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voyager88

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wangkaibo123: 金币+1, 鼓励积极交流经验 3q 2014-08-21 19:51:29
tongyunming: 金币+2, ★有帮助, 谢谢您！ 2014-08-22 06:32:31
可能是柱头残留；以前的强保留性物质，冲柱子时没有冲彻底；水质不好
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微信公众号：Pharmaguider（药事纵横），主页：www.pharmaguider.cn
3楼2014-08-21 16:03:03
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755153002

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wangkaibo123: 金币+1, 鼓励积极交流经验 3q 2014-08-21 19:51:36
你确定你这是色谱级的甲醇？？？
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4楼2014-08-21 16:39:27
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