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tongyunming

新虫 (小有名气)

[求助] 梯度洗脱 300nm 乙腈-0.2%甲酸流动相 色谱甲醇出峰是怎么回事呢 已有5人参与

各位大侠:
       我用HPLC梯度洗脱做三个标准品的混标(色谱甲醇做溶剂),发现不止三个峰。后用甲醇溶剂跑一针,竟出现四个峰,进两针都是如此。附件图片就是甲醇出的峰,最高的有100多mV。请高手指点,可能是什么原因呢?

梯度洗脱 300nm 乙腈-0.2%甲酸流动相 色谱甲醇出峰是怎么回事呢
IMG_20140820_152147.jpg
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lygbxq

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
tongyunming: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢 2014-08-22 17:03:32
你把进混合标准品的图谱与进纯甲醇的图谱合并发来看看。
如果确定不是流动相和柱子的问题,有可能是你进样针或者是六通阀污染了。
可以尝试不进样,直接跑梯度试试看。
10楼2014-08-22 12:19:11
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tongyunming

新虫 (小有名气)


wangkaibo123: 金币+1, 鼓励积极交流经验 3q 2014-08-21 19:51:23
流动相的梯度程序为:
0~45min,乙腈11~28;45~55min,乙腈28~80;55~90min,乙腈80~80
流速4ml/min,进样量5ul
2楼2014-08-21 09:57:55
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voyager88

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wangkaibo123: 金币+1, 鼓励积极交流经验 3q 2014-08-21 19:51:29
tongyunming: 金币+2, 有帮助, 谢谢您! 2014-08-22 06:32:31
可能是柱头残留;以前的强保留性物质,冲柱子时没有冲彻底;水质不好
微信公众号:Pharmaguider(药事纵横),主页:www.pharmaguider.cn
3楼2014-08-21 16:03:03
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755153002

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wangkaibo123: 金币+1, 鼓励积极交流经验 3q 2014-08-21 19:51:36
你确定你这是色谱级的甲醇???
4楼2014-08-21 16:39:27
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