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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 细胞冻存
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hakkie

新虫 (初入文坛)

[求助] 细胞冻存 已有3人参与

结肠癌lovo细胞，25cm培养瓶，冻存时致密度为50%，冻存1ml*2管，一个月后复苏细胞生长状态极差。这个和冻存时密度小有多大关系？冻存前细胞生长状态好；另外由于同时还冻存了其他几管密度90%的同种细胞，复苏后细胞状态挺好，所以冻存液和冻存程序是没问题的。这次复苏因为培养基换了牌子，所以不知道是培养基的问题，还是因为细胞冻存时密度低，冻存效果不好的原因。
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1楼 2014-08-21 09:16:13
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hakkie

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 风信子寻梦 at 2014-08-21 14:08:15
50%冻两管，密度明显太低，冻存液里的DMSO对细胞有毒性，再加上冻存时本来就会死亡一些细胞，冻存时密度太低，就会造成很难复苏！最好是细胞培养到融合率达到70%以上时才去传代或冻存。我们实验室的经验是，当细胞融 ...

多谢回复~
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5楼2014-08-21 17:43:05
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逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
冻存密度小了，我们一般两个25cm2培养瓶长满存一管。
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2楼2014-08-21 10:20:08
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gikyo

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
冻存细胞密度一般（5-10）*10^6个/ml
你的冻存密度太小。培养基换牌子影响不会太大，只要你是用的同类培养基。
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3楼2014-08-21 13:07:55
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风信子寻梦

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hakkie: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-12-07 22:08:47
50%冻两管，密度明显太低，冻存液里的DMSO对细胞有毒性，再加上冻存时本来就会死亡一些细胞，冻存时密度太低，就会造成很难复苏！最好是细胞培养到融合率达到70%以上时才去传代或冻存。我们实验室的经验是，当细胞融合率为90%左右时冻存细胞，一个培养盘（直径10cm）冻存三管！你可以参考一下！
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hakkie
4楼2014-08-21 14:08:15
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