24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1128  |  回复: 7

hakkie

新虫 (初入文坛)

[求助] 细胞冻存 已有3人参与

结肠癌lovo细胞,25cm培养瓶,冻存时致密度为50%,冻存1ml*2管,一个月后复苏细胞生长状态极差。这个和冻存时密度小有多大关系?冻存前细胞生长状态好;另外由于同时还冻存了其他几管密度90%的同种细胞,复苏后细胞状态挺好,所以冻存液和冻存程序是没问题的。这次复苏因为培养基换了牌子,所以不知道是培养基的问题,还是因为细胞冻存时密度低,冻存效果不好的原因。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
冻存密度小了,我们一般两个25cm2培养瓶长满存一管。
2楼2014-08-21 10:20:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gikyo

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
冻存细胞密度一般(5-10)*10^6个/ml
你的冻存密度太小。培养基换牌子影响不会太大,只要你是用的同类培养基。
3楼2014-08-21 13:07:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风信子寻梦

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hakkie: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-12-07 22:08:47
50%冻两管,密度明显太低,冻存液里的DMSO对细胞有毒性,再加上冻存时本来就会死亡一些细胞,冻存时密度太低,就会造成很难复苏!最好是细胞培养到融合率达到70%以上时才去传代或冻存。我们实验室的经验是,当细胞融合率为90%左右时冻存细胞,一个培养盘(直径10cm)冻存三管!你可以参考一下!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2014-08-21 14:08:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hakkie

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 风信子寻梦 at 2014-08-21 14:08:15
50%冻两管,密度明显太低,冻存液里的DMSO对细胞有毒性,再加上冻存时本来就会死亡一些细胞,冻存时密度太低,就会造成很难复苏!最好是细胞培养到融合率达到70%以上时才去传代或冻存。我们实验室的经验是,当细胞融 ...

多谢回复~
5楼2014-08-21 17:43:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风信子寻梦

木虫 (职业作家)

引用回帖:
5楼: Originally posted by hakkie at 2014-08-21 17:43:05
多谢回复~...

不客气
6楼2014-08-22 14:44:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hakkie

新虫 (初入文坛)

是你的血清有问题
7楼2014-12-07 22:04:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Frostwhite

新虫 (初入文坛)

求一瓶lovo细胞
8楼2015-05-12 18:38:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hakkie 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本科双非材料,跨考一志愿华电085801电气,283求调剂,任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 7/350 2026-03-28 21:40 by zhq0425
[考研] 070305高分子化学与物理 304分求调剂 +5 c297914 2026-03-28 5/250 2026-03-28 20:37 by llc239
[考研] 320分,材料与化工专业,求调剂 +9 一定上岸aaa 2026-03-27 13/650 2026-03-28 15:00 by 神马都不懂
[考研] 283求调剂 +7 A child 2026-03-28 7/350 2026-03-28 12:05 by zllcz
[考研] 085602 307分 求调剂 +7 不知道叫什么! 2026-03-26 7/350 2026-03-28 09:57 by 神马都不懂
[考研] 求调剂 +8 张zz111 2026-03-27 9/450 2026-03-28 03:41 by fmesaito
[考研] 298调剂 +3 jiyingjie123 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:57 by wxiongid
[考研] 一志愿211,335分,0856,求调剂院校和导师 +4 倾____萧 2026-03-27 5/250 2026-03-27 11:52 by zhshch
[考研] 求调剂 +3 刘柯@ 2026-03-24 4/200 2026-03-27 11:28 by shangxh
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-26 9/450 2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
[考研] 304材料求调剂 +4 钟llll 2026-03-26 4/200 2026-03-27 03:42 by wxiongid
[考研] 317求调剂 +7 蛋黄咸肉粽 2026-03-26 7/350 2026-03-27 02:29 by fmesaito
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 机械学硕310分,数一英一,一志愿211本科双非找调剂信息 +3 @357 2026-03-25 3/150 2026-03-26 16:34 by by.MENG
[考研] 打过很多竞赛,085406控制工程300分,求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 材料调剂 +3 iwinso 2026-03-23 3/150 2026-03-25 11:29 by greychen00
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[考研] 环境学硕288求调剂 +8 皮皮皮123456 2026-03-22 8/400 2026-03-23 23:47 by 热情沙漠
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 6/300 2026-03-23 21:45 by 子系博
[考研] 070300,一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
信息提示
请填处理意见