24小时热门版块排行榜    

查看: 1265  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

爱一生恋一世

银虫 (小有名气)

[交流] 求指导提质粒过程中应注意的事情 已有6人参与

这几天提质粒,用的ET,可是提了3次了   ,提出来的质粒效果都不太好,师姐也是用的同样的ET提的质粒电泳后就很亮,都是用的碱变性法提的啊    ,大家觉得这个过过程应该注意些什么啊?
回复此楼
任何事情只有靠自己
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凤丫头1988

银虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-08-22 19:54:41
加完溶液II 和溶液III以后都在冰上放2-3分钟,冰上反应不会太剧烈,避免提到基因组片段
最小的事情也要尽力
3楼2014-08-22 10:44:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-08-22 19:54:51
你跟着你师姐提一次,看看她加的试剂量等。
我个人觉得以下需要注意:
1.加溶液2后需要轻轻颠倒混匀,不要太过于剧烈。
加溶液3后也是轻轻上下颠倒混匀。
2.加70%乙醇洗的时候,加个400就够了。
3.从离心的方向上顺着管壁加TER溶解,因为质粒都在那一侧。然后放到37度溶解个10min就可以了。

如果你提几次都是这样,那你同时提你的和你师姐的,看看是技术原因还是菌液的原因。
2楼2014-08-21 16:44:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Hliotrope

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-08-22 19:54:46
质粒很好提的啊,有试剂盒按试剂盒走绝对没问题,碱裂解那步(溶液2),时间别太长,别剧烈摇晃。。。
Someone
4楼2014-08-22 11:00:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

分子2010

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-23 20:20:38
1、溶胶完全就行了,不用太久。
2、最后我们加的是双蒸水,用65度加热过的,并且离心后再把溶液洗出来加到膜上在洗一次。
希望能帮到你。
科研是条不归路!
5楼2014-08-22 20:37:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 269专硕求调剂 +5 金恩贝 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:37 by zhyzzh
[考研] 一志愿211,0703化学310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-21 22:21 by peike
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 333求调剂 +5 87639 2026-03-21 7/350 2026-03-21 19:31 by ColorlessPI
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +5 张vvvv 2026-03-15 7/350 2026-03-21 19:23 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +5 十三加油 2026-03-21 5/250 2026-03-21 18:48 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿南大,0703化学,分数336,求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 302求调剂 +12 呼呼呼。。。。 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:29 by ColorlessPI
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +5 纸鱼ly 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:11 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂! +3 不想理你 2026-03-16 3/150 2026-03-21 03:59 by JourneyLucky
[考研] 二本跨考郑大材料306英一数二 +3 z1z2z3879 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:29 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +4 葵梓卫队 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:02 by JourneyLucky
[考研] 287求调剂 +7 晨昏线与星海 2026-03-19 8/400 2026-03-20 22:19 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
[考研] 生物学调剂招人!!! +3 山海天岚 2026-03-17 4/200 2026-03-19 21:34 by 怎么释怀
[考博] 26申博 +4 八6八68 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨; 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
信息提示
请填处理意见