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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 重组大肠杆菌表达蛋白可溶，但无活性
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
楼主的另一贴，我也回答了你，你不理我！就知道接受写来那个生物化学基本知识都忘的一干二净的人的意见！
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11楼2014-08-21 12:41:42
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励热心回帖交流 2014-08-21 18:00:25
你就按照2楼的说法去做，再加点催化二硫键形成的催化剂！告诉你：二硫键在空气中会自动形成，有氧气反应，即使真的形成了肽链之间的二硫键，也只要使得不同亚基正常的聚合到一起，就会形成正确的二硫键。

还有，一般对于可溶性的球状蛋白质而言，无论是蛋白质分子之间还是不同亚基之间的相互作用一般都是都是非共价的相互作用！
为什么？
1.为了便于聚合和解离，这是一种重要的生物功能的调节方式！也为了遗传上和进化上的安全性，因为每个亚基的编码单位更小，表达出出来出错的可能性更低。绝大多别构酶和别构蛋白质都是多亚基，没有在亚基之间形成任何共价键。
2.非共价聚合时有一个亚基坏了，其他的还能够起作用，不至于蛋白质整个失去功能，更重要的是如果一个亚基坏了，下次装配时坏的亚基就可能不再被识别和装配了！如果多个亚基凑在一起就一般地形成了二硫键哪？！一荣俱荣一损俱损！
3.在不同的生理条件下形成动态的装配过程，灵活的实现生理功能，比如微管，血红蛋白，PKA。
4.细胞转运定位方便，先把各个小单位蛋白质运送过去在装配起来，比整个形成了二硫键的蛋白质一起运过去要方便吧，况且有不少时候可能还要运输多次，比如：在核膜解体和重建时的各种核内蛋白质的跨核膜运输。
等等。
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12楼2014-08-21 12:56:00
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如来神掌

捐助贵宾 (著名写手)
单体和4聚体 形成条带的位置应该不一样吧？请你核实一下哦
“凌波丽”回答的好专业哦！赞！
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生活就像直播,没有彩排的机会,不可能从新来过!所以必须把握好现在的每一个瞬间!
13楼2014-08-21 16:25:01
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jpfwx
引用回帖:
10楼: Originally posted by 凌波丽 at 2014-08-21 12:39:46
蛋白质的四聚体的形成不一定非要形成二硫键！有些蛋白质的四聚体就是靠非共价的次级键结合到一起的，最明显的是血红蛋白！2楼居然说四聚体形成一般是形成了二硫键是没有道理的！不知道阁下的生物化学课是不是及格了 ...

14楼2014-08-21 16:31:40
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匿名

用户注销 (正式写手)
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15楼2014-08-22 22:01:49
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫
想要活性，可以用真核蛋白表达吗，楼上的回答好专业，，，
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
16楼2015-10-20 15:26:20
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