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匿名

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1楼2014-08-20 15:45:50

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凌波丽

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西门吹雪170: 金币+3, 鼓励热心回帖交流 2014-08-21 18:00:25

你就按照2楼的说法去做，再加点催化二硫键形成的催化剂！告诉你：二硫键在空气中会自动形成，有氧气反应，即使真的形成了肽链之间的二硫键，也只要使得不同亚基正常的聚合到一起，就会形成正确的二硫键。

还有，一般对于可溶性的球状蛋白质而言，无论是蛋白质分子之间还是不同亚基之间的相互作用一般都是都是非共价的相互作用！
为什么？
1.为了便于聚合和解离，这是一种重要的生物功能的调节方式！也为了遗传上和进化上的安全性，因为每个亚基的编码单位更小，表达出出来出错的可能性更低。绝大多别构酶和别构蛋白质都是多亚基，没有在亚基之间形成任何共价键。
2.非共价聚合时有一个亚基坏了，其他的还能够起作用，不至于蛋白质整个失去功能，更重要的是如果一个亚基坏了，下次装配时坏的亚基就可能不再被识别和装配了！如果多个亚基凑在一起就一般地形成了二硫键哪？！一荣俱荣一损俱损！
3.在不同的生理条件下形成动态的装配过程，灵活的实现生理功能，比如微管，血红蛋白，PKA。
4.细胞转运定位方便，先把各个小单位蛋白质运送过去在装配起来，比整个形成了二硫键的蛋白质一起运过去要方便吧，况且有不少时候可能还要运输多次，比如：在核膜解体和重建时的各种核内蛋白质的跨核膜运输。
等等。

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12楼2014-08-21 12:56:00

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jpfwx

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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pingweihh(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-08-20 16:54:39
pingweihh: 金币+12, 5 2014-08-21 09:03:45

首先可以确定一点，相同单体构成的四聚体是因为产生了高级结构，一般是二硫键的形成，这样才会有生物活性。
不知道你的四聚体的高级结构是怎么样的。但是大肠杆菌表达的蛋白是不能自己进行后修饰的，也就是说不会将单体正确的组装成有活性的四聚体。你电泳跑出来的蛋白是不是单体的位置？
如果确定单体是正确的可溶表达，你可以试试进行体外复性，看看能不能形成有活性的四聚体。

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