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flll2014

铜虫 (小有名气)

[交流] 请问有没有用GE的PD-10脱盐柱的 已有7人参与

请问有没有用PD-10脱盐柱的,我买的柱子每次只能上样2.5ml的蛋白质,进行脱盐,如果用这一个柱子的话脱盐太慢了,我下一步还要进行去标签。请问大家是怎么用的,用完后如何进行再生,若需脱盐蛋白为同一种还需要再生吗?谢谢!
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jpfwx

金虫 (小有名气)


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为什么不用G-25呢?
年轻,拼搏
2楼2014-08-19 10:20:43
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)


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脱盐就直接用超滤离心和透析好了,任何分子筛层析用于脱盐操作,理论上可行,实际上效率不及直接用超滤离心和透析,除非是要更换缓冲溶液。
3楼2014-08-19 12:12:37
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flll2014

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 凌波丽 at 2014-08-19 12:12:37
脱盐就直接用超滤离心和透析好了,任何分子筛层析用于脱盐操作,理论上可行,实际上效率不及直接用超滤离心和透析,除非是要更换缓冲溶液。

超滤对蛋白质损伤挺严重的,而且容易堵柱子
4楼2014-08-19 14:36:22
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flll2014

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jpfwx at 2014-08-19 10:20:43
为什么不用G-25呢?

G25好些吗?用完这些柱子怎样再生呢
5楼2014-08-19 15:10:07
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jpfwx

金虫 (小有名气)


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引用回帖:
5楼: Originally posted by flll2014 at 2014-08-19 15:10:07
G25好些吗?用完这些柱子怎样再生呢...

G-25挺好的 流速快 分离效果也好  不用再生 用完用稀碱冲洗干净就可以了
年轻,拼搏
6楼2014-08-20 16:51:17
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flll2014

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by jpfwx at 2014-08-20 16:51:17
G-25挺好的 流速快 分离效果也好  不用再生 用完用稀碱冲洗干净就可以了...

如果脱完一批蛋白想立刻再进行下一批脱蛋白脱盐可以吗?用稀碱洗完后好像还要用水冲洗到中性才行吧,这样挺慢的
7楼2014-08-20 18:58:47
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jpfwx

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by flll2014 at 2014-08-20 18:58:47
如果脱完一批蛋白想立刻再进行下一批脱蛋白脱盐可以吗?用稀碱洗完后好像还要用水冲洗到中性才行吧,这样挺慢的...

同一种蛋白就可以,我以前1L的填料做十几个个循环的,期间一直都是一种缓冲体系,只有全部完成才会冲洗柱子。用AKTA很快的啊  怎么会慢呢?
年轻,拼搏
8楼2014-08-21 11:52:45
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帖航

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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3楼: Originally posted by 凌波丽 at 2014-08-19 12:12:37
脱盐就直接用超滤离心和透析好了,任何分子筛层析用于脱盐操作,理论上可行,实际上效率不及直接用超滤离心和透析,除非是要更换缓冲溶液。

用层析脱盐速度非常快,透析太慢,超滤,超滤管很贵的,只能用一次。而且层析脱盐不仅理论可以,实际也可以,蛋白一般在0.3-0.4CV洗下来,而盐在1CV才下来。我用G25脱盐,很好
9楼2014-08-21 11:57:24
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flll2014

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by jpfwx at 2014-08-21 11:52:45
同一种蛋白就可以,我以前1L的填料做十几个个循环的,期间一直都是一种缓冲体系,只有全部完成才会冲洗柱子。用AKTA很快的啊  怎么会慢呢?...

我的填料是8.3ml的,脱盐是快,就是洗柱子比较慢
10楼2014-08-21 20:47:50
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