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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 请问有没有用GE的PD-10脱盐柱的
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flll2014

铜虫 (小有名气)

[交流] 请问有没有用GE的PD-10脱盐柱的 已有7人参与

请问有没有用PD-10脱盐柱的，我买的柱子每次只能上样2.5ml的蛋白质，进行脱盐，如果用这一个柱子的话脱盐太慢了，我下一步还要进行去标签。请问大家是怎么用的，用完后如何进行再生，若需脱盐蛋白为同一种还需要再生吗？谢谢！
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1楼 2014-08-18 21:00:17
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jpfwx

金虫 (小有名气)
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为什么不用G-25呢？
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年轻，拼搏
2楼2014-08-19 10:20:43
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
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脱盐就直接用超滤离心和透析好了，任何分子筛层析用于脱盐操作，理论上可行，实际上效率不及直接用超滤离心和透析，除非是要更换缓冲溶液。
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3楼2014-08-19 12:12:37
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flll2014

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 凌波丽 at 2014-08-19 12:12:37
脱盐就直接用超滤离心和透析好了，任何分子筛层析用于脱盐操作，理论上可行，实际上效率不及直接用超滤离心和透析，除非是要更换缓冲溶液。

超滤对蛋白质损伤挺严重的，而且容易堵柱子
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4楼2014-08-19 14:36:22
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flll2014

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jpfwx at 2014-08-19 10:20:43
为什么不用G-25呢？

G25好些吗？用完这些柱子怎样再生呢
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5楼2014-08-19 15:10:07
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jpfwx

金虫 (小有名气)
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5楼: Originally posted by flll2014 at 2014-08-19 15:10:07
G25好些吗？用完这些柱子怎样再生呢...

G-25挺好的 流速快 分离效果也好  不用再生 用完用稀碱冲洗干净就可以了
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年轻，拼搏
6楼2014-08-20 16:51:17
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flll2014

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by jpfwx at 2014-08-20 16:51:17
G-25挺好的 流速快 分离效果也好  不用再生 用完用稀碱冲洗干净就可以了...

如果脱完一批蛋白想立刻再进行下一批脱蛋白脱盐可以吗？用稀碱洗完后好像还要用水冲洗到中性才行吧，这样挺慢的
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7楼2014-08-20 18:58:47
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jpfwx

金虫 (小有名气)
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7楼: Originally posted by flll2014 at 2014-08-20 18:58:47
如果脱完一批蛋白想立刻再进行下一批脱蛋白脱盐可以吗？用稀碱洗完后好像还要用水冲洗到中性才行吧，这样挺慢的...

同一种蛋白就可以，我以前1L的填料做十几个个循环的，期间一直都是一种缓冲体系，只有全部完成才会冲洗柱子。用AKTA很快的啊  怎么会慢呢？
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年轻，拼搏
8楼2014-08-21 11:52:45
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帖航

银虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by 凌波丽 at 2014-08-19 12:12:37
脱盐就直接用超滤离心和透析好了，任何分子筛层析用于脱盐操作，理论上可行，实际上效率不及直接用超滤离心和透析，除非是要更换缓冲溶液。

用层析脱盐速度非常快，透析太慢，超滤，超滤管很贵的，只能用一次。而且层析脱盐不仅理论可以，实际也可以，蛋白一般在0.3-0.4CV洗下来，而盐在1CV才下来。我用G25脱盐，很好
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9楼2014-08-21 11:57:24
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flll2014

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by jpfwx at 2014-08-21 11:52:45
同一种蛋白就可以，我以前1L的填料做十几个个循环的，期间一直都是一种缓冲体系，只有全部完成才会冲洗柱子。用AKTA很快的啊  怎么会慢呢？...

我的填料是8.3ml的，脱盐是快，就是洗柱子比较慢
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10楼2014-08-21 20:47:50
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