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sakura01_22

木虫 (小有名气)

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[求助] 蛋白质相互作用研究蛋白A能pull-down蛋白B 反之检测不出

如题，在蛋白质相互作用研究中，IP检测，蛋白A能拉下蛋白B，但是蛋白B IP蛋白A时，检测不出。重复3遍左右，依然检测不出，希望哪位虫友能帮忙解答一下。是否存在相互作用只能单方面pull-down的情况，这种情况如何解释？

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心怀希望，放飞梦想！

1楼 2014-08-17 11:30:45

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siriusxuan

木虫 (正式写手)

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引用回帖:

8楼: Originally posted by 凌波丽 at 2014-08-19 01:30:50
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法，是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation） ...

蛋白结合以后可能会遮挡抗原决定簇的观点很有启发性，但跑胶时加上样缓冲液又煮沸的过程，大部分蛋白质X和蛋白质Y的相互作用都会分开的吧，因此即使两种蛋白结合过程中遮盖了抗原决定簇，也不会影响到抗体检测蛋白质吧。

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