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求助 【酵母双杂交实验】 有一步的原理不懂
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最近刚开始接触酵母双杂交,用的是BOONE LAB的SGA 的protocol, 我用的MATα (Y7092)的基因型是can1delta::STE2pr-Sp_his5 lyp1delta his3delta1 leu2delta0 ura3delta0 met15delta0 携带的质粒载体pRS426的基因主要是:ori(f1) - lacZ - T7 promoter - MCS (KpnI-SacI) - T3 promoter - lacI - ori(pMB1) - ampR - ori (2 micron) - URA3 MATa (BY4741)的基因型是:his3∆0 leu2∆0 met15∆0 ura3∆0 我现在的疑问是,为什么最后筛选的培养基是SD/MSG - His/Arg/Lys+can+thi的, 我的MATα不是 His/Arg/Lys缺陷,但筛选的培养基为什么不加这三个? 感觉我的实验里没出现过Arg和Lys呀,为什么这两个忽然冒出来了。。而且实验手册上面也是这么写,我问了下老师老师也说的确是用这个medium。 前两天问了导师一个弱智问题,被鄙视了。。所以先来问问虫友,要是没人知道再去问老师T.T 先谢谢大家!! |
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liusong0725
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