24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 6781  |  回复: 7

水中月佳月影

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助:用间苯二酚法测植物蔗糖含量,为什么做标曲时不显色呢? 已有2人参与

求助:用间苯二酚法(参考张志良的实验书方法)测植物蔗糖含量,为什么做标曲时不显色呢?
  以下是我用的步骤,求大侠指导啊。。。

蔗糖提取与测定(采用间苯二酚法)
原理:酮糖在一定条件下和间苯二酚形成鲜红色,在480nm波长下可比色测定。在一定条件下,本反应为酮糖所特有,故可作为酮糖测定依据。将磨碎后的植物组织用80%乙醇抽提,该提取也可用来测定蔗糖。测定时先用碱与样品共热,破坏其中的还原糖,然后用间苯二酚测定蔗糖中的果糖部分。色素对本实验影响大。

实验药品:2mol/LNaOH,30%HCI(10mol/L),蔗糖标准溶液(取已在80℃烘箱中烘至恒重的分析纯蔗糖100mg配成500ml溶液,即的200ug/ml标准溶液),0.1%间苯二酚溶液(0.1g间苯二酚溶于100ml 95%乙醇,置棕色瓶内保存。)

步骤:吸取可溶性糖提取液0.4ml,加入200ul 2mol/L NaOH,100℃煮沸5min,冷却后加入2.8ml 30%HCI,0.8ml 0.1%间苯二酚,摇匀,80℃水浴反应10min,冷却后在480nm处测定OD值,由标准曲线计算蔗糖含量。
取标准蔗糖溶液稀释成一系列0~100ug/ml(0、20、40、60、80、100)的不同浓度的溶液,按上述方法测OD值,绘制标准曲线。


我做标曲时,从加入200ul 2mol/L NaOH开始和从加入2.8ml 30%HCI这两种都试过,都显色不了,到底该怎么做呢?是蔗糖标准溶液浓度太低了吗?还是什么原因呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

非常感谢各位帮忙回帖出主意的朋友们,谢谢你们的热心帮忙~~
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lddmc

木虫 (正式写手)

同求,我用果糖做标准曲线也不显色,不知道是什么原因。
2楼2014-08-14 15:11:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lddmc

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我做的果糖的标准曲线时也有同样的问题,后来换了sigma的标准品之后才显色,你要不试试换成sigma的标准品做。
3楼2014-09-23 17:38:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

像鱼一样飞吧

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lddmc at 2014-09-23 17:38:46
我做的果糖的标准曲线时也有同样的问题,后来换了sigma的标准品之后才显色,你要不试试换成sigma的标准品做。

sigma标准品是啥?百度不到诶
4楼2017-03-08 15:37:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

像鱼一样飞吧

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你好,我现在也在做蔗糖的标准曲线,也遇到和您一样的问题。首先是不显色,虽然不像测植物组织的时候一样显粉红色但是还是能测出OD值。其次,测出在(0-100微克每毫克)的OD 值太小不能和样品测定的值相近,于是我加大蔗糖浓度500微克每毫克,但是,出现沉淀且不稳定扫描,直接测定时是0.056,摇晃测定是0.189这样子,想问您现在问题解决了么,可以交流一下么
5楼2017-03-08 15:42:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

痛苦的科研狗

新虫 (初入文坛)


晋鹏: 鼓励回帖交流~欢迎常来农林版交流经验~ 2017-10-09 21:30:51
水中月佳月影(晋鹏代发): 金币+1, 鼓励回帖交流~欢迎常来农林版交流经验~ 2017-10-10 19:47:25
引用回帖:
5楼: Originally posted by 像鱼一样飞吧 at 2017-03-08 15:42:50
你好,我现在也在做蔗糖的标准曲线,也遇到和您一样的问题。首先是不显色,虽然不像测植物组织的时候一样显粉红色但是还是能测出OD值。其次,测出在(0-100微克每毫克)的OD 值太小不能和样品测定的值相近,于是我加 ...

我也出现这个问题了,你知道原因了吗

发自小木虫Android客户端
6楼2017-10-09 20:48:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

实验小白!

新虫 (初入文坛)

我想测蔗糖合成酶,按指导书上用间苯二酚法测蔗糖,标准曲线不显得,样品显色但是OD值重复的不好,想知道你们后来是怎么解决的啊

发自小木虫Android客户端
7楼2018-03-13 16:24:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

实验小白!

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 痛苦的科研狗 at 2017-10-09 20:48:59
我也出现这个问题了,你知道原因了吗
...

我也出现这个问题,你们知道原因了么

发自小木虫Android客户端
8楼2018-03-13 22:34:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 水中月佳月影 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 308求调剂 +21 倘若起风了呢 2026-04-05 21/1050 2026-04-10 08:13 by Sammy2
[考研] 调剂 +19 2261744733 2026-04-08 19/950 2026-04-09 19:11 by vgtyfty
[考研] 085600材料与化工专硕329 求调剂 +24 额cc 2026-04-06 25/1250 2026-04-09 16:01 by wp06
[考研] 085404,334分,求调剂 +5 sunjie8888 2026-04-08 8/400 2026-04-09 07:26 by sunjie8888
[考研] 求调剂 +13 柒luck 2026-04-07 13/650 2026-04-08 22:46 by 猪会飞
[考研] 283求调剂 +19 A child 2026-04-04 19/950 2026-04-08 14:26 by xingguangj
[考研] 281求调剂 +10 椰子蘑菇 2026-04-06 10/500 2026-04-08 11:43 by zzucheup
[考研] 304求调剂(085602,过四级,一志愿985) +25 化工人999 2026-04-04 26/1300 2026-04-07 22:06 by hemengdong
[考研] 22408 调剂材料 +7 我叫ez 2026-04-06 8/400 2026-04-07 17:12 by 蓝云思雨
[考研] 081700化学工程与技术 一志愿中海洋 323 求调剂学校 +19 披星河 2026-04-03 19/950 2026-04-07 15:14 by 尽舜尧1
[考研] 316求调剂 +7 yyx想调剂 2026-04-05 7/350 2026-04-07 14:31 by shdgaomin
[考研] 材料调剂 +17 小刘同学吖吖 2026-04-06 18/900 2026-04-07 11:41 by 诗与自由
[考研] 材料与化工363求推荐 +11 zh096 2026-04-04 11/550 2026-04-06 19:14 by guanxin1001
[考研] 一志愿安徽某211 0703化学总分339求调剂 +7 晚风不晚 2026-04-04 7/350 2026-04-06 14:06 by houyaoxu
[考研] 求调剂 +5 wos666 2026-04-03 5/250 2026-04-06 10:13 by 蓝云思雨
[考研] 化学357分,考研调剂 +11 .Starry. 2026-04-04 12/600 2026-04-06 06:28 by houyaoxu
[考研] 工科求调剂 +15 11ggg 2026-04-03 15/750 2026-04-05 16:24 by zzx2138
[考研] 353求调剂 +10 MayUxw1 2026-04-03 10/500 2026-04-05 09:23 by 无际的草原
[考研] 一志愿南农090401,268,求调剂 +5 一木鸟然 2026-04-04 5/250 2026-04-04 17:07 by babysonlkd
[考研] 309求调剂 +4 快乐的小白鸽 2026-04-04 5/250 2026-04-04 15:55 by cql1109
信息提示
请填处理意见