24小时热门版块排行榜    

查看: 7276  |  回复: 7

水中月佳月影

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助:用间苯二酚法测植物蔗糖含量,为什么做标曲时不显色呢? 已有2人参与

求助:用间苯二酚法(参考张志良的实验书方法)测植物蔗糖含量,为什么做标曲时不显色呢?
  以下是我用的步骤,求大侠指导啊。。。

蔗糖提取与测定(采用间苯二酚法)
原理:酮糖在一定条件下和间苯二酚形成鲜红色,在480nm波长下可比色测定。在一定条件下,本反应为酮糖所特有,故可作为酮糖测定依据。将磨碎后的植物组织用80%乙醇抽提,该提取也可用来测定蔗糖。测定时先用碱与样品共热,破坏其中的还原糖,然后用间苯二酚测定蔗糖中的果糖部分。色素对本实验影响大。

实验药品:2mol/LNaOH,30%HCI(10mol/L),蔗糖标准溶液(取已在80℃烘箱中烘至恒重的分析纯蔗糖100mg配成500ml溶液,即的200ug/ml标准溶液),0.1%间苯二酚溶液(0.1g间苯二酚溶于100ml 95%乙醇,置棕色瓶内保存。)

步骤:吸取可溶性糖提取液0.4ml,加入200ul 2mol/L NaOH,100℃煮沸5min,冷却后加入2.8ml 30%HCI,0.8ml 0.1%间苯二酚,摇匀,80℃水浴反应10min,冷却后在480nm处测定OD值,由标准曲线计算蔗糖含量。
取标准蔗糖溶液稀释成一系列0~100ug/ml(0、20、40、60、80、100)的不同浓度的溶液,按上述方法测OD值,绘制标准曲线。


我做标曲时,从加入200ul 2mol/L NaOH开始和从加入2.8ml 30%HCI这两种都试过,都显色不了,到底该怎么做呢?是蔗糖标准溶液浓度太低了吗?还是什么原因呢?
回复此楼
非常感谢各位帮忙回帖出主意的朋友们,谢谢你们的热心帮忙~~
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lddmc

木虫 (正式写手)

同求,我用果糖做标准曲线也不显色,不知道是什么原因。
2楼2014-08-14 15:11:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lddmc

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我做的果糖的标准曲线时也有同样的问题,后来换了sigma的标准品之后才显色,你要不试试换成sigma的标准品做。
3楼2014-09-23 17:38:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

像鱼一样飞吧

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lddmc at 2014-09-23 17:38:46
我做的果糖的标准曲线时也有同样的问题,后来换了sigma的标准品之后才显色,你要不试试换成sigma的标准品做。

sigma标准品是啥?百度不到诶
4楼2017-03-08 15:37:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

像鱼一样飞吧

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你好,我现在也在做蔗糖的标准曲线,也遇到和您一样的问题。首先是不显色,虽然不像测植物组织的时候一样显粉红色但是还是能测出OD值。其次,测出在(0-100微克每毫克)的OD 值太小不能和样品测定的值相近,于是我加大蔗糖浓度500微克每毫克,但是,出现沉淀且不稳定扫描,直接测定时是0.056,摇晃测定是0.189这样子,想问您现在问题解决了么,可以交流一下么
5楼2017-03-08 15:42:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

痛苦的科研狗

新虫 (初入文坛)


晋鹏: 鼓励回帖交流~欢迎常来农林版交流经验~ 2017-10-09 21:30:51
水中月佳月影(晋鹏代发): 金币+1, 鼓励回帖交流~欢迎常来农林版交流经验~ 2017-10-10 19:47:25
引用回帖:
5楼: Originally posted by 像鱼一样飞吧 at 2017-03-08 15:42:50
你好,我现在也在做蔗糖的标准曲线,也遇到和您一样的问题。首先是不显色,虽然不像测植物组织的时候一样显粉红色但是还是能测出OD值。其次,测出在(0-100微克每毫克)的OD 值太小不能和样品测定的值相近,于是我加 ...

我也出现这个问题了,你知道原因了吗

发自小木虫Android客户端
6楼2017-10-09 20:48:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

实验小白!

新虫 (初入文坛)

我想测蔗糖合成酶,按指导书上用间苯二酚法测蔗糖,标准曲线不显得,样品显色但是OD值重复的不好,想知道你们后来是怎么解决的啊

发自小木虫Android客户端
7楼2018-03-13 16:24:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

实验小白!

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 痛苦的科研狗 at 2017-10-09 20:48:59
我也出现这个问题了,你知道原因了吗
...

我也出现这个问题,你们知道原因了么

发自小木虫Android客户端
8楼2018-03-13 22:34:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 水中月佳月影 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 7/350 2026-09-01 15:18 by myrtle
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 21:30 by xiangy672
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
请填处理意见