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想个用户名

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-23 20:29:07
ayouyiyi: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-08-24 10:56:56
片段浓度很低了，切胶一回收这样几乎浓度是不够的。还有，注意到你的空载泳动速度是比你的酶切后的要慢，这是不太正常的，虽然我之前也遇到过，但是问了很多人都说接着连接吧，但我之前的28a的载体一直没有构出来，后来还是果断换了载体，折腾不起
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21楼2014-08-23 11:26:47
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ayouyiyi

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
21楼: Originally posted by 想个用户名 at 2014-08-23 11:26:47
片段浓度很低了，切胶一回收这样几乎浓度是不够的。还有，注意到你的空载泳动速度是比你的酶切后的要慢，这是不太正常的，虽然我之前也遇到过，但是问了很多人都说接着连接吧，但我之前的28a的载体一直没有构出来， ...

嗯，您说的正是，我一直都想知道为何，难得是空载28a的构想原因？ 准备换载体了，怎么做都搞不定。。。您现在用的是什么载体啊，现在成功了吗，谢谢~~
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22楼2014-08-24 10:56:49
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想个用户名

新虫 (小有名气)
引用回帖:
22楼: Originally posted by ayouyiyi at 2014-08-24 10:56:49
嗯，您说的正是，我一直都想知道为何，难得是空载28a的构想原因？ 准备换载体了，怎么做都搞不定。。。您现在用的是什么载体啊，现在成功了吗，谢谢~~...

嗯，换的全式金的一个商品化的蛋白表达载体pEASY-E2，也是是带his标签的，那个很容易构建的
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23楼2014-08-24 15:32:58
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ayouyiyi

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
23楼: Originally posted by 想个用户名 at 2014-08-24 15:32:58
嗯，换的全式金的一个商品化的蛋白表达载体pEASY-E2，也是是带his标签的，那个很容易构建的...

哦哦，好，了解了~
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24楼2014-08-24 20:09:07
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永远一片天

新虫 (正式写手)
不知道楼主PCR阳性后有没有进行测序验证，我们构建质粒后一般都拿去做个测序，比对确认是正确的目的带后才进行摇菌，提取质粒，如果仅仅简单的PCR阳性，很难说明构建成功，PCR灵敏度高，难免会污染。。
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25楼2014-10-17 09:14:23
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