10楼: Originally posted by llj4212008 at 2014-08-03 22:16:57
PET是表达载体，都是低拷贝的质粒，你测一下浓度，切2ug的量，如果不测的话，你的DNA量加30ul，酶各1ul，切2h，片段切的时候也多切点，然后胶回回收或片段纯化，连接时间1h-过夜都可以，试试看，祝顺利！
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11楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-08-04 09:43:27
我的前段时间也是提不出质粒来，师兄说是噬菌体污染。我换了感受态，才做好的。

13楼: Originally posted by ayouyiyi at 2014-08-04 20:14:15
嗯，谢谢~ 达不到2ug额。。。我这次尽量提高浓度了，正在试...

15楼: Originally posted by llj4212008 at 2014-08-05 06:45:45
最少1ug，祝你成功！
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14楼: Originally posted by ayouyiyi at 2014-08-04 20:14:50
是吗，那感受态是自己做的还是用试剂盒的啊？...

17楼: Originally posted by happydove at 2014-08-05 14:34:31
你的胶图跑得很漂亮！
目的基因 你设计的酶切位点引物没问题吧？
目的基因我们一般是做PCR，200ul，分装4管扩，然后胶回收。酶切后再检测。
载体浓度不能太低，酶切后检测。
两者都确保有了，看亮度推测浓度，按 ...

18楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-08-05 15:37:20
我们实验室感受态是自己做的。   我热击没做出来，换的电转做出来的。...