应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 原核表达
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1564  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

我要睡觉

新虫 (小有名气)

[求助] 原核表达 已有2人参与

请问各位大神，我是做原核表达上游也就是负责蛋白的表达，在做小试的时候 4ml LB培养基+200ul菌液，0.5mMIPTG，做两个温度，20℃，37℃。出来的结果是20℃有表达。在扩大培养的时候，按照小试的条件20℃培养，可是结果就是没有表达，试了好几次都不成功，为了防止是其表达量小，把收集的菌体试着让纯化的同事的做了下，确实木有蛋白呀！真的不知道了，求助~~~~~
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-07-30 20:52:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我要睡觉

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by bio_sci at 2014-08-02 12:10:38
表达不稳定，很正常。
首先，蛋白有无毒性？
第二 貌似装液过多，一般发酵摇瓶，不要超过总体积的30%

蛋白没有毒性 之前做出来过 装液量由800ml改成了400ml，结果等待中~~~~~~~
赞一下 回复此楼
7楼2014-08-09 10:20:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

小苹果168

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有的蛋白原核表达不了，可以选择真核表达

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2014-07-30 21:00:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我要睡觉

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小苹果168 at 2014-07-30 21:00:22
有的蛋白原核表达不了，可以选择真核表达

可是小试有表达吖，到了扩大培养就就没有了
赞一下 回复此楼
3楼2014-07-31 22:03:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柠萌粉

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 我要睡觉 at 2014-07-31 22:03:50
可是小试有表达吖，到了扩大培养就就没有了...

扩大培养的时候，用大点的容器去摇，再微调下摇速吧
赞一下 回复此楼
4楼2014-08-01 10:50:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 求调剂 有机化学考研356分 +4 Nadiums 2026-03-25 5/250 2026-03-29 21:00 by 唐沐儿
[考研] 一志愿华东师范大学有机化学专业，初试351分，复试被刷求调剂! +5 真名有冰 2026-03-29 6/300 2026-03-29 20:53 by 唐沐儿
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-24 6/300 2026-03-29 20:45 by 无际的草原
[考研] 322求调剂：一志愿湖南大学 材料与化工（085600），已过六级。 +4 XX小邓 2026-03-29 4/200 2026-03-29 17:34 by 无际的草原
[考研] 291求调剂 +5 Y-cap 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:18 by mumin1990
[考研] 一志愿北京理工大学本科211材料工程294求调剂 +8 mikasa的围巾 2026-03-28 8/400 2026-03-29 12:48 by 无际的草原
[考研] 332求调剂 +8 蕉蕉123 2026-03-28 8/400 2026-03-29 10:46 by 周梓丹
[考研] 289求调剂 +13 新时代材料 2026-03-27 13/650 2026-03-29 01:16 by 544594351
[考研] 343求调剂 +5 爱羁绊 2026-03-28 5/250 2026-03-28 20:53 by 唐沐儿
[考研] 071000生物学求调剂，初试成绩343 +7 小小甜面团 2026-03-25 7/350 2026-03-28 20:25 by 唐沐儿
[考研] 339求调剂，想调回江苏 +6 烤麦芽 2026-03-27 8/400 2026-03-28 10:40 by 烤麦芽
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +8 曼111 2026-03-24 9/450 2026-03-28 07:58 by YYYYX1234
[考研] 一志愿211院校 344分 东北农业大学生物学学硕，求调剂 +5 丶风雪夜归人丶 2026-03-26 8/400 2026-03-27 19:22 by 丶风雪夜归人丶
[考研] 07化学280分求调剂 +10 722865 2026-03-23 10/500 2026-03-27 15:51 by Plutoqq
[考研] 317求调剂 +7 蛋黄咸肉粽 2026-03-26 7/350 2026-03-27 02:29 by fmesaito
[考研] 总分322求生物学/生化与分子/生物信息学相关调剂 +5 星沉uu 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:02 by macy2011
[考研] 一志愿河工大 081700 276求调剂 +4 地球绕着太阳转 2026-03-23 4/200 2026-03-26 14:27 by zzll406
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +4 小鱼爱有机 2026-03-25 4/200 2026-03-26 10:19 by aa331100
[考研] 化工专硕求调剂 +3 question挽风 2026-03-24 3/150 2026-03-24 18:48 by jhhcooi
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭