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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » GABAAR磷酸化相关问题求助
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大公

金虫 (小有名气)

[求助] GABAAR磷酸化相关问题求助已有1人参与

最近要做GABAAR的磷酸化。普通抗体已经买了，但预实验GABAAR实验组和对照组表达差异不大，现在考虑做GABAAR的磷酸化表达。求大侠指点技术方法，做荧光好还是Western好？
希望能提供相关文献，能涉及到实验技术方法以及试剂来源的公司。
谢谢。
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1楼2014-07-25 21:08:30
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
大公(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-07-26 16:58:00
许多蛋白在多个位点上都会被磷酸化。就你的情况而言，你首先要了解该蛋白在你的实验条件下明确有被磷酸化，而且最好磷酸化位点是明确的。否则就变成了寻找磷酸化位点的实验了，方法则完全不同了。如果一切都是知道了，就是单纯看在你实验条件下该蛋白某位点的磷酸化改变情况则问题就变简单多了，特别是如果有该磷酸化位点的特异性抗体，那么只要做普通Western blot就解决问题了。
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2楼2014-07-25 22:19:00
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大公

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-07-25 22:19:00
许多蛋白在多个位点上都会被磷酸化。就你的情况而言，你首先要了解该蛋白在你的实验条件下明确有被磷酸化，而且最好磷酸化位点是明确的。否则就变成了寻找磷酸化位点的实验了，方法则完全不同了。如果一切都是知道了 ...

谢谢。磷酸化位点是明确的。我做的是海马神经元突出部位的GABAAR磷酸化表达。在找抗体的阶段了，想找以前有人做过的抗体，老板也是这样要求的。
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3楼2014-07-26 09:53:58
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader
引用回帖:
3楼: Originally posted by 大公 at 2014-07-25 20:53:58
谢谢。磷酸化位点是明确的。我做的是海马神经元突出部位的GABAAR磷酸化表达。在找抗体的阶段了，想找以前有人做过的抗体，老板也是这样要求的。...

那就容易多了。这种情况多数是有特异性抗体的。
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4楼2014-07-26 10:11:43
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