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hajierlove

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[求助] 菌液pcr,坐等求助已有7人参与

今天做的菌液pcr，三个基因挑了48个单克隆，做菌液pcr，引物是M13通用引物，出来的目的条带都是250bp。750bp。目的片段是500bp。怎么回事？只能证明没有连接上吗？

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踏实

1楼 2014-07-23 20:33:08

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hajierlove

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引用回帖:

11楼: Originally posted by usky_4 at 2014-07-24 04:24:05
举例来说，pGEM-T载体的T7（上游引物）和SP6（下游引物）相隔大概有150bp，所以如果用这对引物的话，得到的产物肯定是大于你的目的基因的。
定向PCR的方法是：假设你需要你的目的基因ORF和载体是同向，那么你可以 ...

为什么之前菌液PCR出来的直接是目的条带

[ 发自小木虫客户端 ]