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dizi011

新虫 (初入文坛)

[求助] (求助)关于HepG2细胞生长的问题~ 已有2人参与

我养的肝癌细胞HepG2生长速度超慢,一般正常传代之后4-5天才能长满,癌细胞会长的这么慢吗~我用的培养基是1640+10%血清+1%双抗,是什么原因造成的呐~求大神们指导哈~
下面这个是1传2之后生长5天的结果~

(求助)关于HepG2细胞生长的问题~
IMG_0569.JPG
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少年,努力吧~~
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、消化时间要合适,时间太短消化不完全,细胞之间相互粘连在一起;时间太长影响细胞活力。
2、接种密度,一瓶(长满80%)传代3-5瓶合适
3、不清楚双抗对细胞生长有没有影响,但没有这么高浓度双抗过,操作规范的话不加双抗也行
4、血清质量问题?换其他血清试试。按说HepG2用小牛血清就长的很好,可以换新生牛甚至胎牛试试。
5、培养基质量问题,类似血清,要用个信得过的牌子。我之前是用DMEM高糖养的HepG2。
3楼2014-07-22 23:06:35
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风信子寻梦

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
细胞长的慢的原因:1、接种密度太低,只会长成一小块一小块的细胞,中间的细胞会没有空间就不会分裂生长;2、吹打不够,消化下来的细胞没有吹打成单个,接种之后也只是会成小块生长,中间的细胞没有空间不分裂;3、血清品质不够,很多细胞只靠血清和培养基中的营养生长,只有一小部分细胞有旁分泌的功能,对营养的要求没有那么高;
2楼2014-07-22 16:25:40
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