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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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四季茶香

铜虫 (小有名气)

[求助] 梯度出大包 已有3人参与

我的梯度:B相0(30%)-10(50%)-20(50%)-45(70%)-50(70%)-55(30%)-60(30%),所有的杂志在45min之前出来,A相国产磷酸盐,B相甲醇,在45-50min之间空走和样品都鼓大包,响应值40mv,方法刚开发时也有,但没有那么大也就4-5mv,安捷伦的,这个打包怎么回事啊,该怎么解决啊,梯度要怎么修改啊。检测波长是220nm。  请虫友指导,谢谢啊。
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星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
四季茶香(zhychen2008代发): 金币+3, 多谢回帖交流 2014-07-24 17:02:45
引用回帖:
9楼: Originally posted by 四季茶香 at 2014-07-23 13:34:46
版主  我空走流动相也是那样的   我是已知杂质都洗脱出来了   但是我看梯度一般都会在洗脱后等度走一下大比例 所以我后面也就加了一个5min的70%   我是怕专家质疑 你后面鼓那么大的包 要是未知杂质在那出峰怎么办...

那你就不要加这个70的高比例了吧,因为你的杂质已经都能洗脱了,再这样走不是自找麻烦么;你说的“但是我看梯度一般都会在洗脱后等度走一下大比例”这个情况确实有,我也这样干过,但要视情况而定,一般方法摸索初期会这样,一旦方法确定了,又加上你这个现状不允许(鼓大包),那最好就是不要这个70的(况且你只走5min,作用不大)。
另外你要是担心存在未知杂质,我建议在方法初期可以走直线梯度直接从10线性渐变至90,那有没有未知杂质基本就可以确定了,以后验证也不用再纠结了。
我是超级天后:天天努力,不落人后!
10楼2014-07-23 13:47:33
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xdx1984

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
样品过滤么?如果过滤了,改成离心取上清液
2楼2014-07-22 16:34:36
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werohthtw

新虫 (小有名气)


首先看空白有没有,空白辅料有没有,跑梯度有梯度峰很正常
3楼2014-07-23 09:02:51
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四季茶香

铜虫 (小有名气)

空走也有的  但是峰鼓包至40mv  会不会怀疑这个方法不好啊?
4楼2014-07-23 11:06:27
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