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四季茶香

铜虫 (小有名气)

[求助] 梯度出大包 已有3人参与

我的梯度:B相0(30%)-10(50%)-20(50%)-45(70%)-50(70%)-55(30%)-60(30%),所有的杂志在45min之前出来,A相国产磷酸盐,B相甲醇,在45-50min之间空走和样品都鼓大包,响应值40mv,方法刚开发时也有,但没有那么大也就4-5mv,安捷伦的,这个打包怎么回事啊,该怎么解决啊,梯度要怎么修改啊。检测波长是220nm。  请虫友指导,谢谢啊。
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四季茶香

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 星海慧儿 at 2014-07-23 11:56:38
梯度出现这种情况很正常的,况且你又是低波长。既然组分都在45min之前出完,空白也和样品在45min后出同样的包那就无需再纠结了,说明这个包就是在这个系统下就应该有的,不干扰测定就别管了。
这种情况说明你的溶剂 ...

版主  我空走流动相也是那样的   我是已知杂质都洗脱出来了   但是我看梯度一般都会在洗脱后等度走一下大比例 所以我后面也就加了一个5min的70%   我是怕专家质疑 你后面鼓那么大的包 要是未知杂质在那出峰怎么办
9楼2014-07-23 13:34:46
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xdx1984

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
样品过滤么?如果过滤了,改成离心取上清液
2楼2014-07-22 16:34:36
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werohthtw

新虫 (小有名气)


首先看空白有没有,空白辅料有没有,跑梯度有梯度峰很正常
3楼2014-07-23 09:02:51
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四季茶香

铜虫 (小有名气)

空走也有的  但是峰鼓包至40mv  会不会怀疑这个方法不好啊?
4楼2014-07-23 11:06:27
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