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梯度出大包 已有3人参与
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| 我的梯度：B相0（30%）-10（50%）-20（50%）-45（70%）-50（70%）-55（30%）-60（30%），所有的杂志在45min之前出来，A相国产磷酸盐，B相甲醇，在45-50min之间空走和样品都鼓大包，响应值40mv,方法刚开发时也有，但没有那么大也就4-5mv,安捷伦的，这个打包怎么回事啊，该怎么解决啊，梯度要怎么修改啊。检测波长是220nm。 请虫友指导，谢谢啊。 |
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【答案】应助回帖
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四季茶香(zhychen2008代发): 金币+3, 多谢回帖交流 2014-07-24 17:02:45
四季茶香(zhychen2008代发): 金币+3, 多谢回帖交流 2014-07-24 17:02:45
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那你就不要加这个70的高比例了吧，因为你的杂质已经都能洗脱了，再这样走不是自找麻烦么；你说的“但是我看梯度一般都会在洗脱后等度走一下大比例”这个情况确实有，我也这样干过  ，但要视情况而定，一般方法摸索初期会这样，一旦方法确定了，又加上你这个现状不允许（鼓大包），那最好就是不要这个70的（况且你只走5min，作用不大）。另外你要是担心存在未知杂质，我建议在方法初期可以走直线梯度直接从10线性渐变至90，那有没有未知杂质基本就可以确定了，以后验证也不用再纠结了。 |
10楼2014-07-23 13:47:33