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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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稻草人∩_∩

木虫 (小有名气)

[求助] Annexin Ⅴ-FITC / PI 双染 倒置荧光显微镜观察 已有1人参与

想用 Annexin Ⅴ-FITC / PI 测药物诱导Hela细胞凋亡,目前有倒置荧光显微镜,想观察一下荧光强度变化,小试了一下,发现绿光很弱,哪位高手做过这样的实验,不惜赐教,定会不胜感激……
我是这样做的,将hela细胞从六空培养板上消化下来,PBS洗两次,染Annexin Ⅴ-FITC / PI10min,又洗了2次,滴几滴到载玻片上,盖玻片,上镜观察,肯定哪个步骤有问题了,恳请高手来帮忙
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CacaoPie

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 稻草人∩_∩ at 2014-07-25 13:53:26
谢谢你的回复 我们买的试剂盒上没有标明胰酶不加EDTA 不过我买了不加EDTA的胰蛋白酶 我还是用流式细胞仪做吧 这个实验好做吗...

不好意思,前段时间没有上小木虫,对于hela细胞还是挺好做的,祝你顺利
4楼2014-08-14 20:20:08
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CacaoPie

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
稻草人∩_∩: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-07-25 13:53:53
我都是用流式检测凋亡的,楼主用倒置荧光显微镜是想通过荧光强度来定量吗?不知道楼主买的哪里的试剂盒,说明书上写这染完要洗两次吗,我买的试剂盒是不用洗的,前面的步骤应该没什么问题,有些试剂盒上会注明胰酶不要加EDTA,不知道你的说明书上有没有?
2楼2014-07-22 19:11:59
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稻草人∩_∩

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by CacaoPie at 2014-07-22 19:11:59
我都是用流式检测凋亡的,楼主用倒置荧光显微镜是想通过荧光强度来定量吗?不知道楼主买的哪里的试剂盒,说明书上写这染完要洗两次吗,我买的试剂盒是不用洗的,前面的步骤应该没什么问题,有些试剂盒上会注明胰酶不 ...

谢谢你的回复 我们买的试剂盒上没有标明胰酶不加EDTA 不过我买了不加EDTA的胰蛋白酶 我还是用流式细胞仪做吧 这个实验好做吗
3楼2014-07-25 13:53:26
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