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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » Annexin Ⅴ-FITC / PI 双染 倒置荧光显微镜观察
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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稻草人∩_∩

木虫 (小有名气)

[求助] Annexin Ⅴ-FITC / PI 双染 倒置荧光显微镜观察 已有1人参与

想用 Annexin Ⅴ-FITC / PI 测药物诱导Hela细胞凋亡，目前有倒置荧光显微镜，想观察一下荧光强度变化，小试了一下，发现绿光很弱，哪位高手做过这样的实验，不惜赐教，定会不胜感激……
我是这样做的，将hela细胞从六空培养板上消化下来，PBS洗两次，染Annexin Ⅴ-FITC / PI10min，又洗了2次，滴几滴到载玻片上，盖玻片，上镜观察，肯定哪个步骤有问题了，恳请高手来帮忙
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1楼 2014-07-21 08:44:16
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CacaoPie

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
稻草人∩_∩: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-07-25 13:53:53
我都是用流式检测凋亡的，楼主用倒置荧光显微镜是想通过荧光强度来定量吗？不知道楼主买的哪里的试剂盒，说明书上写这染完要洗两次吗，我买的试剂盒是不用洗的，前面的步骤应该没什么问题，有些试剂盒上会注明胰酶不要加EDTA，不知道你的说明书上有没有？
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2楼2014-07-22 19:11:59
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稻草人∩_∩

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by CacaoPie at 2014-07-22 19:11:59
我都是用流式检测凋亡的，楼主用倒置荧光显微镜是想通过荧光强度来定量吗？不知道楼主买的哪里的试剂盒，说明书上写这染完要洗两次吗，我买的试剂盒是不用洗的，前面的步骤应该没什么问题，有些试剂盒上会注明胰酶不 ...

谢谢你的回复 我们买的试剂盒上没有标明胰酶不加EDTA 不过我买了不加EDTA的胰蛋白酶 我还是用流式细胞仪做吧 这个实验好做吗
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3楼2014-07-25 13:53:26
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CacaoPie

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 稻草人∩_∩ at 2014-07-25 13:53:26
谢谢你的回复 我们买的试剂盒上没有标明胰酶不加EDTA 不过我买了不加EDTA的胰蛋白酶 我还是用流式细胞仪做吧 这个实验好做吗...

不好意思，前段时间没有上小木虫，对于hela细胞还是挺好做的，祝你顺利
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4楼2014-08-14 20:20:08
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