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urbest金虫 (正式写手)
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CHIP超声遇到了怪现象已有3人参与
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最近做CHIP实验，结果卡在了超声这一步， 细胞类型是癌细胞，试剂盒用的是milipore的，细胞福尔马林固定十分钟，裂解，开始超声： 超声条件：30%最大功率，工作功率在10w左右，超声15秒，停45秒，反复…… 我试过超声10次，20次，40次， 然后取5ul 超声产物（或未超声的细胞裂解液）+45ul CHIP dilute buffer，加RNA酶A，37度半小时，加蛋白酶K，62度2小时， 然后取20ul，电泳 结果如图所示 不管我超声10次 20次 还是40次，结果都是如此 请高手指导，我该怎么办？  Sonication_20140708.jpg |
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9楼2014-07-23 12:02:49
jurkat.1640
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2楼2014-07-17 16:24:34
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| 我用的也是millipore，你用的哪个型号，我超声是VCX的，也可能是你功率不够大，你可以这样试试功率，拿一个样本出来，超30%，35%，40%，45%，50%，每超完5-10s观察有无泡沫产生，没有可以继续增加功率，直到产生泡沫前那个功率，然后定了功率后就是摸超声循环，5次，10次，15次逐次递增，每次超完后取2-5ul出来待跑电泳，我跑电泳没有加那个chip dulition |
3楼2014-07-17 16:39:10
urbest
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4楼2014-07-18 01:58:30