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姣妹崽

新虫 (小有名气)

[求助] PCR10uL体系如何确定? 已有2人参与

新虫刚开始接触分子生物学实验,本周设计的引物到了,想要做一个梯度PCR摸索一下温度,不知道这个体系要如何确定,在线求解。。
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jingrong978

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-07-26 21:48:17
还是看文献吧,文献中的也不一定是标准的,先试一下发表的杂志较高等级的文章做法。祝好。
攻读海洋石油降解菌研究
2楼2014-07-14 16:51:56
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姣妹崽

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jingrong978 at 2014-07-14 16:51:56
还是看文献吧,文献中的也不一定是标准的,先试一下发表的杂志较高等级的文章做法。祝好。

谢谢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2014-07-19 01:43:36
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader


【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-07-26 21:48:23
首先看一下你引物的Tm值(比如55C),然后可以设定一个较宽的范围进行测试,最终根据产物的特异性和产量确定最合适的annealing温度。许多PCR仪具有gradient PCR的功能,摸索起来很方便,一次就完成了。
4楼2014-07-19 02:47:56
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