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质粒保存 已有3人参与
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虫虫们 质粒要怎么保存呢 借来的质粒 很不容易 很怕保存失活了 有谁可以指点一下吗 在此先谢谢各位高人了 |
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leonaliu2013
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cong葱(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-07-11 11:12:47
cong葱(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-07-11 11:12:47
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在-20度放着应该是不会有太大的问题。但是是这样的，首先你的质粒是别人给你的，你无法确定他给你的这个质粒的质量是好是坏。我上次向别人要了一个质粒，拿到之后发现，转化到大肠杆菌和我的宿主菌中都不长。也就是说质粒本身可能有问题。还有一次，别人给我的质粒，我转化之后，提质粒然后做了酶切，发现大小根本不是我要的质粒，后来联系她，她说给我错了。其实你往大肠杆菌里面转或者往农杆菌里面转都行，但是要做个转化，然后再大量的提取一下，进行酶切验证。不然你无法确定她给你的质粒对不对。如果她给你的质粒量很大，比如50微升，那么你可以不用转化，-20度保存就可以了。但是如果量不大，你不仅要往目标菌里面转，而且还要做酶切，一旦失败一次，这个质粒就越来越少，用完了怎么办？毕竟是人家给的。这个质粒的信息你可以到网上查文献，看看是否有，也可以向给你质粒的人要，至少你要知道这个质粒有多大，有哪些酶切位点，从而用来验证这个质粒是否是你需要的那个。 |
12楼2014-07-10 21:01:30
lxj341401
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2楼2014-07-09 11:35:56
leonaliu2013
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3楼2014-07-09 12:30:41
4楼2014-07-09 17:13:10
40