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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 质粒保存
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cong葱

铜虫 (小有名气)

[求助] 质粒保存 已有3人参与

虫虫们 质粒要怎么保存呢 借来的质粒 很不容易 很怕保存失活了 有谁可以指点一下吗  在此先谢谢各位高人了
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1楼 2014-07-09 11:32:09
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励回帖交流！ 2014-07-09 12:32:17
cong葱: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-07-09 17:17:17
质粒很稳定的，－20或者－80度低温保存就好了；也可以导入宿主细胞，保存细胞。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2014-07-09 11:35:56
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leonaliu2013

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-09 12:32:28
质粒很稳定，-20摄氏度保存即可，不过建议你做个转化，转到宿主细胞中，然后保存菌种，这样更保险。
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3楼2014-07-09 12:30:41
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cong葱

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by leonaliu2013 at 2014-07-09 12:30:41
质粒很稳定，-20摄氏度保存即可，不过建议你做个转化，转到宿主细胞中，然后保存菌种，这样更保险。

宿主细胞？我实验里要把质粒转到农杆菌中 那保存的时候也是转到农杆菌中吗？
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4楼2014-07-09 17:13:10
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cong葱

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lxj341401 at 2014-07-09 11:35:56
质粒很稳定的，－20或者－80度低温保存就好了；也可以导入宿主细胞，保存细胞。

哦 好的 谢谢 那有什么办法可以知道这个质粒上都带有什么序列吗？
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5楼2014-07-09 17:16:51
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
cong葱: 金币+1 2014-07-11 15:12:09
引用回帖:
4楼: Originally posted by cong葱 at 2014-07-09 17:13:10
宿主细胞？我实验里要把质粒转到农杆菌中 那保存的时候也是转到农杆菌中吗？...

农杆菌可以保存，但最佳方案是保存在大肠杆菌里。这就需要你向质粒提供方要详细信息，比如抗性之类的，这样才好转化保存。
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
6楼2014-07-09 17:31:08
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leonaliu2013

木虫 (著名写手)
★ ★
cong葱(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-07-11 11:12:28
引用回帖:
4楼: Originally posted by cong葱 at 2014-07-09 17:13:10
宿主细胞？我实验里要把质粒转到农杆菌中 那保存的时候也是转到农杆菌中吗？...

农杆菌是革兰氏阴性菌吧？你问问给你质粒的人，这个质粒是不是可以再大肠杆菌中复制。如果可以，个人建议你转到大肠杆菌中试试，因为一般细菌质粒都能在大肠杆菌中存活。大肠杆菌容易生长，好培养，你把质粒转进去，以后只需要活化大肠杆菌，然后提质粒，再往你的农杆菌中转，就可以了。不过，你转化大肠的时候，只需要用1微升质粒就可以了。不要用太多。
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7楼2014-07-09 18:13:22
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laojiu9878

至尊木虫 (文坛精英)

九牛

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
cong葱: 金币+1 2014-07-10 15:36:31
科学发展，导入细菌，真真实实，无穷焉
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但愿人长久
8楼2014-07-10 10:37:04
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可帅儿

银虫 (正式写手)
-20度长期保存
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追随自己的心！不要做让自己后悔的事！
9楼2014-07-10 12:26:31
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cong葱

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by leonaliu2013 at 2014-07-09 18:13:22
农杆菌是革兰氏阴性菌吧？你问问给你质粒的人，这个质粒是不是可以再大肠杆菌中复制。如果可以，个人建议你转到大肠杆菌中试试，因为一般细菌质粒都能在大肠杆菌中存活。大肠杆菌容易生长，好培养，你把质粒转进去 ...

嗯 谢谢亲 我还想知道下 要是转到大肠杆菌中的话 还需要知道这个质粒的什么信息 除了抗性 还有什么？
现在质粒我在-20保存 因为不知道接下来怎么做  这样质粒会有问题吗？
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10楼2014-07-10 15:35:57
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