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cong葱

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 可帅儿 at 2014-07-10 12:26:31
-20度长期保存

谢谢
11楼2014-07-10 15:36:19
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leonaliu2013

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
cong葱(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-07-11 11:12:47
引用回帖:
10楼: Originally posted by cong葱 at 2014-07-10 15:35:57
嗯 谢谢亲 我还想知道下 要是转到大肠杆菌中的话 还需要知道这个质粒的什么信息 除了抗性 还有什么?
现在质粒我在-20保存 因为不知道接下来怎么做  这样质粒会有问题吗?...

在-20度放着应该是不会有太大的问题。但是是这样的,首先你的质粒是别人给你的,你无法确定他给你的这个质粒的质量是好是坏。我上次向别人要了一个质粒,拿到之后发现,转化到大肠杆菌和我的宿主菌中都不长。也就是说质粒本身可能有问题。还有一次,别人给我的质粒,我转化之后,提质粒然后做了酶切,发现大小根本不是我要的质粒,后来联系她,她说给我错了。其实你往大肠杆菌里面转或者往农杆菌里面转都行,但是要做个转化,然后再大量的提取一下,进行酶切验证。不然你无法确定她给你的质粒对不对。如果她给你的质粒量很大,比如50微升,那么你可以不用转化,-20度保存就可以了。但是如果量不大,你不仅要往目标菌里面转,而且还要做酶切,一旦失败一次,这个质粒就越来越少,用完了怎么办?毕竟是人家给的。这个质粒的信息你可以到网上查文献,看看是否有,也可以向给你质粒的人要,至少你要知道这个质粒有多大,有哪些酶切位点,从而用来验证这个质粒是否是你需要的那个。
12楼2014-07-10 21:01:30
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心碎

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-07-16 15:46:00
我们的是保存在大肠杆菌里的,就是冻一管或几管菌液在-80,几年了,用还可以呢
实验顺利,其他都是浮云
13楼2014-07-11 09:23:53
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