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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 质粒保存
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cong葱

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 可帅儿 at 2014-07-10 12:26:31
-20度长期保存

谢谢
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11楼2014-07-10 15:36:19
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leonaliu2013

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
cong葱(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-07-11 11:12:47
引用回帖:
10楼: Originally posted by cong葱 at 2014-07-10 15:35:57
嗯 谢谢亲 我还想知道下 要是转到大肠杆菌中的话 还需要知道这个质粒的什么信息 除了抗性 还有什么？
现在质粒我在-20保存 因为不知道接下来怎么做  这样质粒会有问题吗？...

在-20度放着应该是不会有太大的问题。但是是这样的，首先你的质粒是别人给你的，你无法确定他给你的这个质粒的质量是好是坏。我上次向别人要了一个质粒，拿到之后发现，转化到大肠杆菌和我的宿主菌中都不长。也就是说质粒本身可能有问题。还有一次，别人给我的质粒，我转化之后，提质粒然后做了酶切，发现大小根本不是我要的质粒，后来联系她，她说给我错了。其实你往大肠杆菌里面转或者往农杆菌里面转都行，但是要做个转化，然后再大量的提取一下，进行酶切验证。不然你无法确定她给你的质粒对不对。如果她给你的质粒量很大，比如50微升，那么你可以不用转化，-20度保存就可以了。但是如果量不大，你不仅要往目标菌里面转，而且还要做酶切，一旦失败一次，这个质粒就越来越少，用完了怎么办？毕竟是人家给的。这个质粒的信息你可以到网上查文献，看看是否有，也可以向给你质粒的人要，至少你要知道这个质粒有多大，有哪些酶切位点，从而用来验证这个质粒是否是你需要的那个。
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12楼2014-07-10 21:01:30
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心碎

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-16 15:46:00
我们的是保存在大肠杆菌里的，就是冻一管或几管菌液在-80，几年了，用还可以呢
赞一下 回复此楼
实验顺利，其他都是浮云
13楼2014-07-11 09:23:53
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