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xwlkitty

金虫 (小有名气)

[求助] 谁会用LH-20凝胶柱 已有8人参与

一个发酵液跑了LH-20,用甲醇:水=2:8跑的。没分开,那应该增加水还是增加甲醇含量?
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顿悟
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forevernever

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-07-06 19:45:09
LH-20是类似分子筛作用,是靠分子大小不同进行分离,而不是靠吸附分离的。你可以考虑换其他洗脱液试试,或者分别增大水和甲醇的比例都试试看,如果都不行的话只能说明你的样品不适合用凝胶柱分离,换硅胶试试吧
2楼2014-07-03 10:52:30
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gzyxiaoqiang

金虫 (小有名气)


感谢参与,应助指数 +1
辣笔v小新: 金币+1, 应助指数-1, 鼓励应助交流 2014-07-06 13:44:38
建议用其他溶解性好的溶剂!
jianchi!
3楼2014-07-03 17:33:22
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xwlkitty

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by forevernever at 2014-07-03 10:52:30
LH-20是类似分子筛作用,是靠分子大小不同进行分离,而不是靠吸附分离的。你可以考虑换其他洗脱液试试,或者分别增大水和甲醇的比例都试试看,如果都不行的话只能说明你的样品不适合用凝胶柱分离,换硅胶试试吧

我目前的分离有4-5个峰离得比较近,希望把它们拉开。可能我描述的不是很恰当。
顿悟
4楼2014-07-03 20:59:06
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~kane~

银虫 (正式写手)


xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-07-06 19:45:15
增加柱子的长度
???
5楼2014-07-03 22:34:13
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xwlkitty

金虫 (小有名气)

那通过改变流动相的极性不可以吗?
顿悟
6楼2014-07-04 08:11:15
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gujinwang

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-07-06 19:45:22
个人觉得如果洗脱液能很好的溶解样品就符合过LH-20的条件了,分不开的话只能说明样品里的东东MW太接近了
7楼2014-07-05 20:45:25
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chenjiajiang198

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-07-06 19:45:31
楼上有朋友说LH-20只是靠分子筛而没有吸附…………话不能说绝对了…………建议LZ好好的看看“Preparative Gel Chromatography on Sephadex LH-20”这本书………………
8楼2014-07-06 14:42:16
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cyr001

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-07-06 19:45:36
可以试试二氯甲烷:甲醇=1:1
9楼2014-07-06 19:08:50
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cjpballack

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

上sephadex-LH20色谱柱,首先得选一个合适的溶剂,能把样品都溶了的~如果分不开,可能样品不适合sephadex柱~
但行好事,莫问前程
10楼2014-07-06 22:23:09
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