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晶晶然

铜虫 (初入文坛)

[求助] siRNA遇到有机溶剂 已有1人参与

请教各位大神:
    甲醇 以及聚乙二醇对siRNA有什么影响?会使它沉淀或者降解吗?
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爽量守恒
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biostar2009

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【答案】应助回帖

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晶晶然(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-07-03 12:22:59
低级醇,如甲醇乙醇异丙醇,因为其两亲性质,对于多聚核酸,这种富含负电荷的多聚物而言,都是脱水剂,多负电荷的核酸依赖于水层的负电荷阻隔而溶解于水,醇类的加入破坏水层,导致带电多聚物的沉淀。这就是醇沉的原理之一。
PEG这个东西有很多系列,比如常用的PEG600,PEG2000,PEG4000,PEG8000等等,低级PEG可以起到吸水,而间接提高水溶性物质的浓度,促进反应的作用,比如在DNA连接反应中,高级PEG同样可以起到沉淀核酸的作用,比如PEG8000可以选择性沉淀cccDNA,在传统质粒制备过程中常用。
最后,上述所有都取决于这些醇类的浓度!
2楼2014-07-02 17:18:37
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晶晶然

铜虫 (初入文坛)

您好,大神,我还想问一下 “上述所有都取决于这些醇类的浓度!”这句话的意思,那么例如无水乙醇的浓度应该很高了吧,这会使单链的microRNA沉淀吗?所说的沉淀,是什么状态?聚集成团,还是几个microRNA聚集在一起,但仍然分散在溶液中??沉淀也可以再复溶吗?
爽量守恒
3楼2014-07-23 17:33:33
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