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三爷111

金虫 (小有名气)

[求助] 关于BMDM-骨髓来源的巨噬细胞的培养。 已有2人参与

最近在用骨髓细胞诱导巨噬细胞，冲出骨髓-过筛网-裂红之后将细胞放在大培养皿里让其贴壁2h后，取上清放到新的培养皿里加1640完全培养基和50ng/ml的M-CSF培养6天，中间半量换液两次。但养出来的细胞在20倍镜下观察胞内有空泡，不知道是怎么会事，是细胞本身就是这样还是细胞因子的用量太大呢？求高人指教啊！

关于BMDM-骨髓来源的巨噬细胞的培养。
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巨噬细胞实验

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1楼 2014-07-01 11:48:12
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青云瀚海

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 三爷111 at 2014-09-16 09:41:39
非常感谢您的回答，我还想再问一下，你们实验室取下来的骨髓细胞不用贴壁2h-4h之后弃掉贴壁的细胞，收集上清里的细胞这一步吗？是一只老鼠的两条腿的骨髓细胞分成两个培养瓶培养，还是一条腿的骨髓细胞分成两个瓶培 ...

我们实验室没有2h-4h之后弃掉贴壁的细胞，收集上清里的细胞这一步。我下室才半年，这是师兄们所用的诱导巨噬细胞的方法。是两条腿的分成了两瓶（你也可以试一下分三瓶，因为我觉得分两瓶其实密度也挺大的，分三瓶应该也没问题）。诱导好的细胞形态还好，但是必须尽快用，如果超过十几天形态就会变圆。另外，阳性率我没有测过，我的师兄他们之前曾经测过，说是只要诱导成功的差不多都是，所以后来诱导时就没再测过。
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其实这个问题是可以解决的！
8楼2014-09-22 12:37:30
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yipan

铜虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
细胞老了。营养过剩。个人观点。
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2楼2014-07-01 13:21:01
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三爷111

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yipan at 2014-07-01 13:21:01
细胞老了。营养过剩。个人观点。

那你培养过这种细胞吗？这是要用细胞因子从祖细胞诱导分化过来的，必须要诱导到6-7天的样子。你有什么改进的建议吗？
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3楼2014-07-01 15:12:46
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yipan

铜虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
三爷111: 金币+1, 基本没有帮助 2014-07-01 21:15:36
这个改进我还真讲不出，按步骤做就挺好。
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4楼2014-07-01 16:19:04
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