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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 化学分析 » 求助 摩尔吸光系数
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yufei6915

木虫 (著名写手)

飞

[求助] 求助 摩尔吸光系数 已有3人参与

各位战友，请教大家关于分析化学的问题。我的实验是测试蛋白的脂肪酶活性，方法是用酶标仪读取OD405nm值，之后再换算成酶活力单位。我的问题是，因为摩尔消光系数是在浓度1mol//L 光程1cm的条件时测得的，而我实验的底物浓度是0.5mmol/L不是1mol/L，反应用的不是比色皿，光程不是1cm，那我如何用摩尔消光系数 计算酶活力呢？谢谢！
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goodluckformyself~~
1楼 2014-06-25 21:23:10
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xiaofei_lu

木虫 (小有名气)
★
crity328: 金币+1, 感谢交流，欢迎常来~ 2014-06-30 19:06:34
引用回帖:
5楼: Originally posted by yufei6915 at 2014-06-26 10:59:56
恩，我懂你这个意思。我现在的问题就是我的实验条件不是在标准的条件下进行的，是底物浓度是0.5mmol/L，光程0.3125cm，那我计算酶活力的时候如何用摩尔吸光系数计算呢？？ 酶活力的计算公式是：
U=A*V/ t*ε...

你直接测的可能不是摩尔消光系数，摩尔消光系数只能计算出来。如果你的仪器可以在标准条件下直接给出摩尔消光系数，那 ε = A/(1M*1cm),这个值是错误的，那你就要先用这个错误的值计算出A，然后再用 ε = A/(0.5*10^-3mM*0.3125cm) 计算出正确的摩尔消光系数。
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7楼2014-06-26 11:19:35
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xiaofei_lu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
变换一下啊
A = εcl
ε = A/cl
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2楼2014-06-26 03:10:50
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yufei6915

木虫 (著名写手)

飞
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaofei_lu at 2014-06-26 03:10:50
变换一下啊
A = εcl
ε = A/cl

如果我的ε是16000，那当c=0.5mmol/L l=0.3125cm时，A=2.5；这个意思是当我c=0.5mmol/L l=0.3125cm时，吸光系数是2.5的意思吗？可以在后面的计算中直接带入2.5作为吸光系数计算吗？ 谢谢回复！
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goodluckformyself~~
3楼2014-06-26 08:26:22
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xiaofei_lu

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yufei6915 at 2014-06-26 08:26:22
如果我的ε是16000，那当c=0.5mmol/L l=0.3125cm时，A=2.5；这个意思是当我c=0.5mmol/L l=0.3125cm时，吸光系数是2.5的意思吗？可以在后面的计算中直接带入2.5作为吸光系数计算吗？ 谢谢回复！...

A是吸光度，不是吸光系数，你测出来的应该是吸光度吧。
ε是摩尔吸光系数。
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4楼2014-06-26 10:46:58
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