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xiehe018

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a50044758

银虫 (小有名气)

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xiehe018(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-06-25 13:34:17
你这样的情况就要换酶了,不要纠结了,对于1000左右的片段PCR,taq酶的扩增效率是最好的,如果高保真酶扩不出来是正常的,PFU和primerstar的扩增效率远低于TAQ酶,这个我做过对比的。
你可以试试phanta EVO 高保真酶或者phusion高保真酶,效率和taq酶差不多,略低一点点,你加上那个PCR enhance buffer 效率会提高不少。
7楼2014-06-25 08:50:01
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gyesang

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xiehe018(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-25 13:34:06
你是什么酶扩增你这个基因的啊,有这么多突变,估计你用的taq,建议用高保真酶PCR,比如用Pfu,KOD之类的酶
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2014-06-24 17:05:19
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古月木木

新虫 (著名写手)

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-06-24 19:36:10
master保真度一般,建议用EXtaq,LAtaq都可以,扩片段的时候避免突变或替换或gap
3楼2014-06-24 17:33:18
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xiehe018

禁虫 (小有名气)

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4楼2014-06-24 17:35:54
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