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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 真菌全细胞有转化，但是破碎之后没有反应，求解
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douxx

新虫 (小有名气)

[求助] 真菌全细胞有转化，但是破碎之后没有反应，求解 已有3人参与

目前在做真菌的生物转化（糖基化）：将底物5mg投入70mL的真菌培养基中，4d后转化率几乎100%。

为了弄清楚催化糖基化反应的酶是可溶性的还是膜结合性的，将真菌用石英砂研磨破碎，流程如下图示：

反应体系为：200 uL粗酶液、1 uL底物、2 uL供体；pH7.4；37℃反应过夜

但是各个部分均没有反应。

真心求各位帮忙分析原因！

真菌全细胞有转化，但是破碎之后没有反应，求解
a.jpg
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1楼 2014-06-22 18:43:24
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bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
douxx: 金币+2 2014-08-21 14:42:18
需要ATP吧，不然怎么反应
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5楼2014-08-20 16:22:51
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douxx

新虫 (小有名气)
有高人能指点一下么？
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2楼2014-06-26 10:42:31
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jinshengfang

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
douxx: 金币+5 2014-08-21 14:42:11
首先声明：我不是高人，我只是做生物催化的。我觉得是不是糖基化过程中需要一种辅助因子了，而细胞被破坏后，这种因子也相应的被破坏
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生物催化
4楼2014-08-20 15:44:15
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

需要TDP-糖基供体。生物转化时菌体可以不断合成糖基供体。破碎后，供体等量太少不足以反应至检测到。
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6楼2014-08-21 17:46:14
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