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songdaofeng银虫 (著名写手)
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块状凝胶材料药物释放 已有2人参与
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小弟做了块状水凝胶释放阿霉素，不是那种纳米凝胶。现在打算做free DOX 和Hydrogel loaded DOX 的cytotoxicity实验，看了很多文献，都是这种柱状图， 有一点实在不明白，Concentration of doxorubicin(g/mL) 就是阿霉素的浓度，是怎么定义的呢？free DOX可以自己配成指定浓度，但是Hydrogel loaded DOX这个是怎么算出来的呢？我自己理解，可不可以用释放液来做cytotoxicity这个实验，因为做释放曲线的时候，需要收集不同时间点的释放液，把这个释放液稀释到和free DOX相同的浓度，然后灭菌，再去做cytotoxicity实验，不过找了很多文献，没有人这么做的，大多数都是些纳米凝胶，粉末状的，吸附阿霉素以后，可以直接加到细胞培养基里面。 |
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 生物材料 |
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xibeikongque
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2楼2014-06-13 23:01:44
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药物被包裹在圆柱状的凝胶里面。我打算用间接法做cytotoxicity的实验，如果是空白凝胶，在PBS浸泡后，直接取浸泡液加在培养液里面，然后做MTT实验。对于包裹阿霉素的凝胶，我也想用这种方法，但是问题就是，如果用PBS浸泡的话，会有阿霉素释放出来，那么图中所给的阿霉素浓度，是否就是浸泡液中阿霉素的浓度呢？如果是的话，干脆就直接取做释放曲线用的那个释放液不就行了么？Preparing of drug solution extracted from the CS–Au hybrid hydrogels: both the blank hydrogel and the DOX loaded hydrogel are soaked in fresh PBS for 48h, and then the solution was sterilized. The drug solution extracted is diluted by PBS pH 7.4 in different drug concentration. 这是我看的一个步骤，我提出的问题就是基于这段话。 |
3楼2014-06-14 16:04:27
xibeikongque
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4楼2014-06-14 22:04:58
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songdaofeng: 金币+5 2014-06-18 18:44:20
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songdaofeng: 金币+5 2014-06-18 18:44:20
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Biodegradable pH/temperature-sensitive oligo(b-amino ester urethane) hydrogels for controlled release of doxorubicin.Acta Biomaterialia 7 (2011) 3123–3130 建议你看看这篇文章，我也做水凝胶载阿霉素的，我想用你说的方法做，我们老板不同意，要求我直接在胶表面养细胞，我现在还不知道阳性对照怎么做。 |
5楼2014-06-17 17:11:43
songdaofeng
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songdaofeng(likedong1021代发): 金币+10, 感谢回帖交流！ 2014-09-27 23:25:34
songdaofeng(likedong1021代发): 金币+10, 感谢回帖交流！ 2014-09-27 23:25:34
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我现在想用这个方法试试从凝胶中释放出来的阿霉素是否还具有药效，但是这种方法我我几个问题想要跟你探讨探讨。一是释放液的灭菌问题，我做到了30天，隔天取样也至少有15组样品，再加上空白凝胶组，至少有30组样品，要是用滤膜灭菌，就要用30个，很浪费，但是我用的是盐酸阿霉素，不太稳定，不知道能否用紫外或者高温高压灭菌？二是，假如MTT测毒性，释放液的加入量问题，因为每次取样里面还有的阿霉素都不一样，这样每次做的实验就没有可比性了。 |
8楼2014-06-18 20:13:36
songdaofeng
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你说的很对，阿霉素盐酸盐确实不稳定，所以释放液应该马上进行紫外测量，这样的话，释放曲线是正常的。我觉得只能用滤膜灭菌了，因为高温锅灭菌，阿霉素肯定分解了，紫外灯灭菌的效果不是很好，有可能会染菌。还有就是，我觉得不用每个样品都灭菌的，只需要把你要用的浓度的那个释放液灭菌就可以了，前提是这些操作尽量连续的完成，比如说你取了释放液，就马上测吸光度，计算浓度，然后去灭菌，再加到培养板里面。我觉得阿霉素浓度差异之所以大，因为几点原因：1有可能释放环境的影响，比如说你选的容器大小，这些都对释放有一些影响，2就是摇床的转速，我试过，100和200转的震荡速度，得出的曲线是不同的。3可能是有的样品，你稍微放久了一会，就变质了，所以吸光度就低了很多。释放液尽量放在冰箱里面，但也不要太久，我总结的就是，连续的做每一个过程。 |
9楼2014-06-18 20:38:16
songdaofeng
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