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碧荷叶

铜虫 (初入文坛)

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[交流] PCR产物可以直接用来做酶切吗？

最近作PCR产物双酶切，回收后酶切1.5h，3.5h和过夜，最后电泳图没什么区别，怀疑酶切开。有人说用PCR产物直接做双酶切比回收后再切更容易。请教PCR产物可以直接用来做双酶切吗？

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1楼 2008-03-24 15:51:08

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傻子

木虫 (正式写手)

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专业: 临床分子生物学检验

reasonspare(金币+0,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.兄弟很热心.而且很有幽默,但是不要让人误会你的意思.

引用回帖:

Originally posted by annwt at 2008-3-24 20:57:
我还看了你的另一个帖子，知道你酶切是连接转化，如果酶切位点在PCR产物的两端，PCR产物酶切后很难判断是否切开，以至影响下一步的连接转化，如果一次成功没的说,如果多次失败,建议先回收加A连T载体转化，再提质粒 ...

同意，有时候无法确定是否切开，这么做比较保险，不差那么一步吧。直接切有时候要看人品滴……^_^