24小时热门版块排行榜    

查看: 3069  |  回复: 16

沙伯略

捐助贵宾 (正式写手)

[求助] Caco-2培养在Transwell里面电阻值长到很大之后,又开始降低,为什么? 已有2人参与

养过Caco-2并接种过Transwel的战友,请帮帮我~~~如题,我把Caco-2细胞以2*10^5/ml的密度接种到Transwell培养板(每个transwel板接种0.5ml,Corning3460,孔径0.4um,直径12mm),第1、3、5、7、11、17、19、21天测量跨膜电阻抗值。。。发现电阻值在第11天已达到1500Ω,但是,之后,随着培养时间的增加,第17、19、21天,电阻值又开始降低,一直从1500降到1200,又讲到900多,有的甚至降到500多。请问老师们:这是由于接种浓度过大导致的吗?还是由于有污染呢?还是由于其它的原因呢???
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

向前出发,永远向前!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

绿色杯子

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 沙伯略 at 2014-06-13 22:24:54
电阻计用的是milipore的,比较小,所以一直放在超净工作台里面的,每次使用之前照紫外,而且用75%乙醇浸泡电极15min了,应该没问题,并且,是某几个孔的电阻先下降,后来的都下降了,之后一般达到500-700Ω,又开始 ...

1.你的孔板更换了吗?我用的24孔板,换液的时候连板也换掉的。下室里容易长菌,那种团块状的,染菌的孔电阻值很低,就那种1,2,300的样子。
2.我换液不用枪的,用玻璃的那种巴斯管,这个换液的时候冲击力比较小。保证没有把膜弄破的话,你那个板子多大的呢?我用的底面积0.33cm2的transwell就是可以挂到24孔板上的,换液上室大约400ul,下室1ml。接种密度1~2*10^5.你换液是每天换还是隔天换的?是不是你的细胞太多,培养液不够用啊?换液的时候培养基什么色的啊?
9楼2014-06-14 20:01:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

绿色杯子

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
沙伯略: 金币+19, ★★★很有帮助 2014-06-13 22:15:19
是不是你换液的时候把底部长的细胞单层膜弄坏了?细胞太多的话会爬到transwell的壁上
培养液隔天换的话什么颜色?换液的时候有浓重的怪味吗?
4楼2014-06-13 10:55:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙伯略

捐助贵宾 (正式写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by feizaiyey at 2014-06-25 10:02:41
楼组,我记得你之前的TEER很低,请问下你是如何提高你的TEER的啊~~~

换了一株细胞就上去了,估计是上次那株细胞的代数太靠后了~
向前出发,永远向前!
14楼2014-06-25 23:22:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

沙伯略

捐助贵宾 (正式写手)

大虫们请不吝赐教啊!!!
向前出发,永远向前!
2楼2014-06-10 23:14:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liupeng0215

新虫 (初入文坛)


【答案】应助回帖

你后面换液怎么换的啊

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2014-06-13 10:03:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

绿色杯子

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
沙伯略: 金币+17, ★★★很有帮助 2014-06-13 22:19:55
对了,还有你的电阻计保证无菌吗?因为我以前养的时候被染菌过,就是因为电阻计染菌,然后一个多月浪费掉
5楼2014-06-13 10:59:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙伯略

捐助贵宾 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 绿色杯子 at 2014-06-13 10:55:55
是不是你换液的时候把底部长的细胞单层膜弄坏了?细胞太多的话会爬到transwell的壁上
培养液隔天换的话什么颜色?换液的时候有浓重的怪味吗?

您好,首先多谢您的回复!换液的时候,下室1.5lm,我换了1ml。上室0.5ml,我用200ul的枪头换取两次共计0.4ml培养液。每次都小心翼翼的,因此我排除是枪头把单层膜弄坏的情况。现在怀疑是接种密度太大的缘故,不知道你意下如何?(我的接种浓度是4*10^5个/ml)
向前出发,永远向前!
6楼2014-06-13 22:19:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙伯略

捐助贵宾 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 绿色杯子 at 2014-06-13 10:59:59
对了,还有你的电阻计保证无菌吗?因为我以前养的时候被染菌过,就是因为电阻计染菌,然后一个多月浪费掉

电阻计用的是milipore的,比较小,所以一直放在超净工作台里面的,每次使用之前照紫外,而且用75%乙醇浸泡电极15min了,应该没问题,并且,是某几个孔的电阻先下降,后来的都下降了,之后一般达到500-700Ω,又开始慢慢的升,但上升后一般不超过1000Ω,远未恢复到之前最高的1800Ω左右。如果是污染,应该是急剧下降,至零吧?当然,也有的孔一直讲到零(减去空白得到的值)。不知道大侠还有其他的原因没?
向前出发,永远向前!
7楼2014-06-13 22:24:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙伯略

捐助贵宾 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by liupeng0215 at 2014-06-13 10:03:55
你后面换液怎么换的啊

部分换液~
向前出发,永远向前!
8楼2014-06-13 22:25:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙伯略

捐助贵宾 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 绿色杯子 at 2014-06-14 20:01:53
1.你的孔板更换了吗?我用的24孔板,换液的时候连板也换掉的。下室里容易长菌,那种团块状的,染菌的孔电阻值很低,就那种1,2,300的样子。
2.我换液不用枪的,用玻璃的那种巴斯管,这个换液的时候冲击力比较小。 ...

我用的是12孔板,Corning3460,孔径0.4um,直径12mm。上室0.5ml,下室1.5ml。可是我找不到长菌的理由啊~电阻仪一直在超净台内,每次用之前75%乙醇浸泡擦拭。换也是每天换的~电阻比较小的孔,培养基确实明显比其他的孔更黄~
向前出发,永远向前!
10楼2014-06-15 23:36:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 沙伯略 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分,一志愿四川大学,诚心求调剂 +5 吃吃吃才有意义 2026-03-19 5/250 2026-03-19 16:18 by 30660438
[考研] 材料专硕274一志愿陕西师范大学求调剂 +8 薛云鹏 2026-03-13 8/400 2026-03-19 15:36 by haoshis
[考研] 一志愿985,本科211,0817化学工程与技术319求调剂 +10 Liwangman 2026-03-15 10/500 2026-03-19 10:25 by 无际的草原
[考研] 330求调剂 +3 小材化本科 2026-03-18 3/150 2026-03-18 21:55 by 无懈可击111
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +5 梨花珞晚风 2026-03-17 5/250 2026-03-18 14:49 by haxia
[考研] 070300化学319求调剂 +6 锦鲤0909 2026-03-17 6/300 2026-03-18 13:22 by Iveryant
[考研] 280求调剂 +6 咕噜晓晓 2026-03-18 7/350 2026-03-18 11:25 by 无际的草原
[考研] 材料,纺织,生物(0856、0710),化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考研] 268求调剂 +7 好运连绵不绝 2026-03-12 8/400 2026-03-17 20:28 by xilongliang
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +4 张vvvv 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
[考研] 302求调剂 +4 小贾同学123 2026-03-15 8/400 2026-03-17 10:33 by 小贾同学123
[考研] 274求调剂 +5 时间点 2026-03-13 5/250 2026-03-17 07:34 by 热情沙漠
[考研] 321求调剂 +5 大米饭! 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 中科院材料273求调剂 +4 yzydy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 15:59 by Gaodh_82
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化,一志愿:哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
信息提示
请填处理意见