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沙伯略

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[求助] Caco-2培养在Transwell里面电阻值长到很大之后,又开始降低,为什么? 已有2人参与

养过Caco-2并接种过Transwel的战友,请帮帮我~~~如题,我把Caco-2细胞以2*10^5/ml的密度接种到Transwell培养板(每个transwel板接种0.5ml,Corning3460,孔径0.4um,直径12mm),第1、3、5、7、11、17、19、21天测量跨膜电阻抗值。。。发现电阻值在第11天已达到1500Ω,但是,之后,随着培养时间的增加,第17、19、21天,电阻值又开始降低,一直从1500降到1200,又讲到900多,有的甚至降到500多。请问老师们:这是由于接种浓度过大导致的吗?还是由于有污染呢?还是由于其它的原因呢???
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绿色杯子

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 沙伯略 at 2014-06-15 23:36:44
我用的是12孔板,Corning3460,孔径0.4um,直径12mm。上室0.5ml,下室1.5ml。可是我找不到长菌的理由啊~电阻仪一直在超净台内,每次用之前75%乙醇浸泡擦拭。换也是每天换的~电阻比较小的孔,培养基确实明显比其他的 ...

1.既然培养基明显比其他的孔更黄,那就是染菌了,至于染菌就是换液的时候操作问题了。(这边带我的老师给我讲过这个问题)
2.抑或那几个孔细胞太多,培养基消耗的更多,不够用了,导致细胞“饿”死了。但是如果你接种的时候吹打均匀了,这个应该就排除了。
11楼2014-06-16 09:35:04
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沙伯略

捐助贵宾 (正式写手)

大虫们请不吝赐教啊!!!
向前出发,永远向前!
2楼2014-06-10 23:14:53
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liupeng0215

新虫 (初入文坛)


【答案】应助回帖

你后面换液怎么换的啊

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2014-06-13 10:03:55
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绿色杯子

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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沙伯略: 金币+19, ★★★很有帮助 2014-06-13 22:15:19
是不是你换液的时候把底部长的细胞单层膜弄坏了?细胞太多的话会爬到transwell的壁上
培养液隔天换的话什么颜色?换液的时候有浓重的怪味吗?
4楼2014-06-13 10:55:55
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