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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » PCR扩增跑胶
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伊梦青lhq

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR扩增跑胶 已有2人参与

各位大虾，求助啦！
我用提取的RNA进行反转录，然后用所得的cDNA进行PCR扩增。分别扩增了3个基因，c-myc，β-actin和hTERT，其中c-myc和β-actin都可以跑出条带，只有hTERT没有条带，做了三次，结果都是空白，胶上什么都没有，这是怎么回事，问题出在哪呢？
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1楼 2014-06-09 18:07:05
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逍潇

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 伊梦青lhq at 2014-06-11 21:26:53
非常非常感谢您的帮助和建议，我试一下。
我用hepG2细胞做western blot，可以看到hTERT蛋白的条带，是否可以说明这个hepG2细胞是可以表达hTERT？
另外我想问一下您是用什么方法看出这个引物没问题的呢？
我用一 ...

检查引物我用的是http://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/
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17楼2014-06-20 13:58:39
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逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
伊梦青lhq: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 学习了！ 2014-06-11 10:39:41
你用的什么组织或细胞提的RNA？可能是引物出了问题？
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2楼2014-06-09 18:30:28
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伊梦青lhq

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 逍潇 at 2014-06-09 18:30:28
你用的什么组织或细胞提的RNA？可能是引物出了问题？

HepG2 人肝癌细胞，其他的两个基因都可以跑出条带来的。
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3楼2014-06-09 19:43:20
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逍潇

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 伊梦青lhq at 2014-06-09 19:43:20
HepG2 人肝癌细胞，其他的两个基因都可以跑出条带来的。...

检查一下引物的序列
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4楼2014-06-09 20:37:12
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