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伊梦青lhq

新虫 (初入文坛)

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[求助] PCR扩增跑胶已有2人参与

各位大虾，求助啦！
我用提取的RNA进行反转录，然后用所得的cDNA进行PCR扩增。分别扩增了3个基因，c-myc，β-actin和hTERT，其中c-myc和β-actin都可以跑出条带，只有hTERT没有条带，做了三次，结果都是空白，胶上什么都没有，这是怎么回事，问题出在哪呢？

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1楼 2014-06-09 18:07:05

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伊梦青lhq

新虫 (初入文坛)

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送红花一朵

引用回帖:

12楼: Originally posted by 逍潇 at 2014-06-11 11:12:17
还有，72度延伸时间不要那么长，30s~1min足矣，你这个基因目的产物长度好像只有200多bp....

非常非常感谢您的帮助和建议，我试一下。
我用hepG2细胞做western blot，可以看到hTERT蛋白的条带，是否可以说明这个hepG2细胞是可以表达hTERT？
另外我想问一下您是用什么方法看出这个引物没问题的呢？
我用一个在线软件看了一下
http://biocompute.bmi.ac.cn/CZlab/MFEprimer-2.0/，
怎么得到的序列并不是hTERT（ ttaggg ）的重复序列呢，或者是我看不懂其结果中seq2+seq1中间那一段序列，这指的是什么呢？

谢谢！