应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 脱盐纯化
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
131/2返回列表12下一页
查看: 1702  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

冰雨@@雾晴

银虫 (小有名气)

[求助] 脱盐纯化 已有6人参与

大侠们好：
       我目前要做一个实验，反应步骤是这样的：第一步反应结束后，用PBS过G-25脱盐，进行纯化。但是现在实验室没有AKTA纯化设备，我要怎么操作呀，有没有有经验的大侠，提供一些参考。
      谢谢大家！
回复此楼

» 猜你喜欢
选中一个目标，坚持不懈的走下去！
1楼 2014-06-09 10:28:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
个人觉得，你要做的第一步就是问问旁边哪个实验室或者哪个学校、单位有AKAT！
赞一下 回复此楼
2楼2014-06-09 11:15:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
youlinglyw: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-06-09 15:41:27
不过柱的话可以用PBS透析，买点透析带~
赞一下 回复此楼
3楼2014-06-09 12:16:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Davie_Meagen

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有没有泵和紫外检测器？？有的话也可以做。
每次上样10-15%柱体积样品。分开收集就可以了。
一般蛋白有紫外吸收峰在35-60%柱体积，看情况吧。祝你好运。
赞一下 回复此楼
4楼2014-06-09 17:48:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

寂静之林

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
脱盐纯化，其实很简单的，不一定要用到分子筛，可以考虑一下超滤，或者更简单的透析。
超滤的话，要有一台低温高速离心机（可以2-8℃离心10000rpm以上），然后挑选合适孔径带滤膜的离心管就，超滤5-6次就可以了，滤膜的孔径根据你蛋白的分子量大小来决定；
透析的话，需要的设备就更简单了，烧杯、搅拌设备，把蛋白装进透析袋里，扎紧之后，用PBS来搅拌透析，大概1小时换一次PBS，换几次就可以了，如果蛋白在室温不太稳定的话，还可以放到冰箱里去透析。透析袋孔径的大小，同样根据你蛋白的分子量大小来决定。
赞一下 回复此楼
5楼2014-06-09 17:51:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冰雨@@雾晴

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Davie_Meagen at 2014-06-09 17:48:38
有没有泵和紫外检测器？？有的话也可以做。
每次上样10-15%柱体积样品。分开收集就可以了。
一般蛋白有紫外吸收峰在35-60%柱体积，看情况吧。祝你好运。

谢谢！
回复此楼
选中一个目标，坚持不懈的走下去！
6楼2014-06-09 21:12:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冰雨@@雾晴

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 寂静之林 at 2014-06-09 17:51:05
脱盐纯化，其实很简单的，不一定要用到分子筛，可以考虑一下超滤，或者更简单的透析。
超滤的话，要有一台低温高速离心机（可以2-8℃离心10000rpm以上），然后挑选合适孔径带滤膜的离心管就，超滤5-6次就可以了，滤 ...

先谢谢！关键是我要更换BUFFER，用超滤的话可以做到吗？
赞一下 回复此楼
选中一个目标，坚持不懈的走下去！
7楼2014-06-09 21:13:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

寂静之林

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 冰雨@@雾晴 at 2014-06-09 21:13:27
先谢谢！关键是我要更换BUFFER，用超滤的话可以做到吗？...

超滤也可以做到的。
带滤膜的离心管，在离心的过程中，蛋白分子会被截留下来，小分子杂质和液体会被带走，然后再加入你需要的缓冲液，继续离心5-6次，这时候蛋白所处的缓冲体系就是你后面加入的缓冲液，这样就更换了Buffer啦，如果你还要换别的Buffer，那就继续离心了。
我在工作中，经常会需要对蛋白进行标记，都是用超滤的方法来处理蛋白分子的，目的就是：1、脱盐纯化，去掉蛋白溶液里的各种防腐剂、盐类；2、更换缓冲液，让蛋白在合适的pH体系里跟我的标记物进行反应。
赞一下 回复此楼
8楼2014-06-10 22:04:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爨乡主人

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以用透析袋，也可以用millipore的超滤管，只要有离心机就能用。
赞一下 回复此楼
9楼2014-06-11 19:46:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蠕动泵加上检测器就可以了
赞一下 回复此楼
10楼2014-06-11 21:15:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 冰雨@@雾晴 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703一志愿9，初试成绩：338，四六级已过，有科研经历，求调剂！ +6 Zuhui0306 2026-03-25 6/300 2026-03-30 16:31 by nothing投稿中
[考研] 288资源与环境专硕求调剂，不限专业，有学上就行 +5 lllllos 2026-03-30 5/250 2026-03-30 15:05 by cq2548
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856材料化工 | GPA 4.07 | 有科研经历 +8 cccchenso 2026-03-23 8/400 2026-03-30 14:14 by w虫虫123
[考研] 375求调剂 +6 雨夏整夜 2026-03-29 6/300 2026-03-30 10:21 by herarysara
[考博] 26申博自荐 +6 whh869393 2026-03-24 6/300 2026-03-29 21:05 by nxgogo
[考研] 材料科学与工程求调剂 +6 深V宿舍吧 2026-03-29 6/300 2026-03-29 20:51 by 唐沐儿
[考研] 291求调剂 +5 Y-cap 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:18 by mumin1990
[考研] 2026年华南师范大学欢迎化学，化工，生物，生医工等专业优秀学子加入！ +3 llss0711 2026-03-28 6/300 2026-03-29 10:26 by llss0711
[考研] 298求调剂 +4 种圣赐 2026-03-28 4/200 2026-03-29 08:42 by q1092522407
[考研] 316求调剂 +7 江辞666 2026-03-26 7/350 2026-03-28 21:28 by sanrepian
[考研] 315分求调剂 +7 26考研上岸版26 2026-03-26 7/350 2026-03-28 04:05 by fmesaito
[考研] 求调剂 +4 零八# 2026-03-27 4/200 2026-03-27 18:07 by yu221
[考研] 274求调剂 +17 顾九笙要谦虚 2026-03-24 23/1150 2026-03-27 15:16 by caszguilin
[考研] 279 分 求调剂 +4 睡个好觉_16 2026-03-24 4/200 2026-03-27 15:05 by 醉在风里
[考研] 322求调剂 +4 我真的很想学习 2026-03-23 4/200 2026-03-27 13:51 by 杨杨杨紫
[考研] 324求调剂 +5 hanamiko 2026-03-26 5/250 2026-03-27 10:33 by wangjy2002
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿天津大学339材料与化工求调剂 +3 江往卖鱼 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:42 by 王小欠i
[考研] 网络空间安全0839招调剂 +4 w320357296 2026-03-25 6/300 2026-03-25 17:59 by 255671
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭