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冰雨@@雾晴

银虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
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红花: 1
帖子: 135
在线: 50.8小时
虫号: 1032379
注册: 2010-05-31
性别: MM
专业: 生物化学

[求助] 脱盐纯化已有6人参与

大侠们好：
我目前要做一个实验，反应步骤是这样的：第一步反应结束后，用PBS过G-25脱盐，进行纯化。但是现在实验室没有AKTA纯化设备，我要怎么操作呀，有没有有经验的大侠，提供一些参考。
谢谢大家！

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选中一个目标，坚持不懈的走下去！

1楼 2014-06-09 10:28:23

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

寂静之林

银虫 (小有名气)

BioEPI: 1
应助: 8 (幼儿园)
金币: 256.8
红花: 1
帖子: 55
在线: 51.3小时
虫号: 2399506
注册: 2013-04-03
性别: GG
专业: 临床免疫学检验

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

脱盐纯化，其实很简单的，不一定要用到分子筛，可以考虑一下超滤，或者更简单的透析。
超滤的话，要有一台低温高速离心机（可以2-8℃离心10000rpm以上），然后挑选合适孔径带滤膜的离心管就，超滤5-6次就可以了，滤膜的孔径根据你蛋白的分子量大小来决定；
透析的话，需要的设备就更简单了，烧杯、搅拌设备，把蛋白装进透析袋里，扎紧之后，用PBS来搅拌透析，大概1小时换一次PBS，换几次就可以了，如果蛋白在室温不太稳定的话，还可以放到冰箱里去透析。透析袋孔径的大小，同样根据你蛋白的分子量大小来决定。