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xissy

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助,枯草营养培养基 已有2人参与

最近在看关于枯草的书,有一段话摘抄自营养培养基一节。不是很理解。麻烦哪位大侠点拨一下!谢谢!
Because  of  their  rather  granular  consistency,  colonies  of  B. subtilis  grown
on  simple  nutrient  agar  plates  can  be  difficult  to  use  consistently  for
inoculating  other  cultures.  This  is  particularly  noticeable  when  inoculating
liquid  cultures,  since  clumps  of  cells  often remain  intact,  increasing  in  size
as  the  culture  grows  and  producing  very  heterogeneous  cultures.  These
problems  may  be  overcome  to  some  extent  by  the  use  of  a  straight  wire
rather  than  a loop  for inoculation.  The  sides  of  the  tube  or  flask just  above
the  surface  of  the  médium  should  be  wetted  with  a  little  médium  and  the
inoculating  cell  mass  macérated  to  a  smooth  paste  with  the  wire.  Difficul-
ties  can  also  be  experienced  when  testing  the  phenotype  of  colonies  by
spot  inoculating  from  nutrient  agar  plates,  since  the  tendency  to  clump
leads  to  biomass  growth  at  the  site  of  inoculation.  Clones  can  be  falsely
scored  as  positive  even  w h e n  antibiotic  selection  is  used.
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yipan

铜虫 (职业作家)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
在做枯草转化吗?这个实验有点麻烦啊,很多的实验室都在做,做出来的不多,因为枯草不稳定因素太多了。呵呵。
2楼2014-06-06 09:46:07
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xqxqxhxh1

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xissy: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-06-06 11:14:36
楼主给出的这段英文的意思于下:
由于枯草杆菌的成粒粘滞性导致从基本培养基上的菌落用于均匀接种困难, 这在将其接种到液体培养基中时应尤其注意, 因为常导致接种后不均匀生长, 可用接种针代替接种环接种, 并且在接入瓶培养液上方的瓶壁上浸湿接入的细胞团可在一定程度上克服接种后成团的现象。当用营养琼脂上的菌作菌种点接后检测菌落特征时, 也存在生长不均的现象。即使在抗生素筛选实验中,  由于枯草杆菌细胞粘滞成团, 也导致出现假阳性现象。
祝您成功!
自己啥都不懂
3楼2014-06-06 10:43:02
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xissy

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yipan at 2014-06-06 09:46:07
在做枯草转化吗?这个实验有点麻烦啊,很多的实验室都在做,做出来的不多,因为枯草不稳定因素太多了。呵呵。

转化已经摸索出来了。现在主要是优化表达。
4楼2014-06-06 11:13:19
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xissy

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xqxqxhxh1 at 2014-06-06 10:43:02
楼主给出的这段英文的意思于下:
由于枯草杆菌的成粒粘滞性导致从基本培养基上的菌落用于均匀接种困难, 这在将其接种到液体培养基中时应尤其注意, 因为常导致接种后不均匀生长, 可用接种针代替接种环接种, 并且在接 ...

好厉害!
5楼2014-06-06 11:14:39
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xissy

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xqxqxhxh1 at 2014-06-06 10:43:02
楼主给出的这段英文的意思于下:
由于枯草杆菌的成粒粘滞性导致从基本培养基上的菌落用于均匀接种困难, 这在将其接种到液体培养基中时应尤其注意, 因为常导致接种后不均匀生长, 可用接种针代替接种环接种, 并且在接 ...

但是我还是不太理解,为什么枯草杆菌细胞粘滞成团会导致假阳性的出现呢?到目前好像还没碰到过培养不均的现象。

书上又接着说:为了避免这些问题,和不同批次的不纯琼脂导致的抗生素干扰问题,我们使用更为昂贵和营养的Penassay broth。在这种培养基平板上生长的克隆子形态变异相对较小,更容易接种。

这是否说明培养基的营养也会有极大的影响呢。
6楼2014-06-06 11:18:26
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xqxqxhxh1

捐助贵宾 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by xissy at 2014-06-06 11:18:26
但是我还是不太理解,为什么枯草杆菌细胞粘滞成团会导致假阳性的出现呢?到目前好像还没碰到过培养不均的现象。

书上又接着说:为了避免这些问题,和不同批次的不纯琼脂导致的抗生素干扰问题,我们使用更为昂贵 ...

抗生素假阳性是因为细胞成团导致细胞吸收的抗生素少,所以可以在抗生素平板上生长。另外,培养基成分确实会影响菌的生长。
自己啥都不懂
7楼2014-06-06 12:02:50
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思恋是一种病

银虫 (小有名气)

学习了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
8楼2014-06-06 16:18:32
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陈_劼_翔

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by xissy at 2014-06-06 11:18:26
但是我还是不太理解,为什么枯草杆菌细胞粘滞成团会导致假阳性的出现呢?到目前好像还没碰到过培养不均的现象。

书上又接着说:为了避免这些问题,和不同批次的不纯琼脂导致的抗生素干扰问题,我们使用更为昂贵 ...

不是所有枯草都粘性大,我们实验室几株枯草,只有一株是液体培养容易结团的。
这是签名~
9楼2014-06-08 11:22:39
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xissy

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 陈_劼_翔 at 2014-06-08 11:22:39
不是所有枯草都粘性大,我们实验室几株枯草,只有一株是液体培养容易结团的。...

原来如此啊。看来我要学习的太多太多了。
10楼2014-06-09 10:07:25
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