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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 食用真菌，摇瓶种子液总染菌
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moxiaolan33

铁虫 (小有名气)

[求助] 食用真菌，摇瓶种子液总染菌 已有5人参与

接种到发酵液之前要先确定种子液的发酵天数，因此打算测生长曲线
问题：1.大概要选择第7天的种子液接种到发酵液，因此生长曲线打算测到11天，每个做3个平行，一共要做33瓶，可是培养箱放不下那么多瓶怎么办，而且总染菌，所以总是测不出完成的生长曲线怎么办。
           2.测生长曲线是将摇的种子液是将种子液通过布氏漏斗过滤，干燥，称重，可是摇过的摇瓶壁上会有一层干物质，有的壁上多，有的壁上少，是培养基还是菌？这样称出来干重会相差较大，会不会不准？

十分困扰，测了好几个月都测不出来完整曲线，到现在也不能确定摇瓶天数，求大神帮助
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1楼 2014-06-05 11:20:26
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wzq_ing

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
moxiaolan33: 金币+5, ★有帮助 2014-06-06 09:45:20
不知道你用多大的瓶子做的曲线，可以换小一号的瓶子做，这样看能不能放下，是在不行，可以按2楼说的，
染菌问题还是一步一步来排除，空白对照，严格消毒，无菌间，超净台什么的都处理一次，把环境影响因素排除再说，还有操作

最后看看菌种又没有问题，换一支对比
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5楼2014-06-05 16:14:21
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mayborn

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dllchina: 金币+2, 鼓励应助 2014-06-06 08:11:40
moxiaolan33: 金币+5, ★有帮助 2014-06-06 09:44:57
1.测量生长曲线可以分几批做，比如这次测1~5天的，总共15瓶；下次再测6~10天的。只要保证其他条件都不变，所测得的数据还是具有统计意义的。

2.按道理来说，如果发酵摇瓶摇了好多天只会有菌丝球，没有什么沉淀出现（我做的就是这样的）。另外，你测菌丝干重，可以用滤纸进行真空抽滤，烘干后计算其差值就得出你的菌丝的干重了，不会存在有什么干物质粘在内壁的现象了。
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6楼2014-06-05 20:37:13
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竭泽之鱼

新虫 (小有名气)
食用真菌培养确实比较脆弱，容易染菌。建议多排除实验上自己操作的问题，至于放不下，可以从第2、3天开始，这样可以少几瓶。

[ 发自小木虫客户端 ]
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11楼2014-06-06 23:42:09
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普通回帖

ahxalg3211

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2014-06-05 16:06:19
moxiaolan33: 金币+5, ★有帮助 2014-06-06 09:45:58
没有做过食用菌，仅做建议：
1、条件不允许的话，先减少平行吧，看看数据的平行性再说；染菌的问题，只有自己想想可能哪个环节不严格了，灭菌、操作、设备、种子等都注意下吧。
2、不知道你的培养基有没有固形物。按照你的方法，无论瓶壁上是菌还是培养基，都应该用水洗下来，一起过滤吧。
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2楼2014-06-05 12:31:19
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20093651

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2014-06-05 16:06:32
说不定不是染菌，食用菌里面也有内生菌的，可能是内生菌生长的原因
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但行好事，莫问前程
3楼2014-06-05 12:44:11
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moxiaolan33

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ahxalg3211 at 2014-06-05 12:31:19
没有做过食用菌，仅做建议：
1、条件不允许的话，先减少平行吧，看看数据的平行性再说；染菌的问题，只有自己想想可能哪个环节不严格了，灭菌、操作、设备、种子等都注意下吧。
2、不知道你的培养基有没有固形物。 ...

谢谢
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4楼2014-06-05 14:38:02
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moxiaolan33

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by mayborn at 2014-06-05 20:37:13
1.测量生长曲线可以分几批做，比如这次测1~5天的，总共15瓶；下次再测6~10天的。只要保证其他条件都不变，所测得的数据还是具有统计意义的。

2.按道理来说，如果发酵摇瓶摇了好多天只会有菌丝球，没有什么沉淀出 ...

谢谢
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7楼2014-06-06 09:44:31
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moxiaolan33

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wzq_ing at 2014-06-05 16:14:21
不知道你用多大的瓶子做的曲线，可以换小一号的瓶子做，这样看能不能放下，是在不行，可以按2楼说的，
染菌问题还是一步一步来排除，空白对照，严格消毒，无菌间，超净台什么的都处理一次，把环境影响因素排除再说 ...

谢谢
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8楼2014-06-06 09:44:44
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xqxqxhxh1

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
粘在内壁上的物质究竟是菌还是培养基, 只要随机抽几瓶, 取壁上的物质镜检一下就可以确定。控制污染的三个环节: 菌种、培养基、无菌操作均应严格无菌, 祝您成功!
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自己啥都不懂
9楼2014-06-06 09:51:07
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xiaoamuchong

专家顾问 (职业作家)

科研工作者
O(∩_∩)O加油~。
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曾经有人问我为什么要学微生物，我只是想离生命的本质更近一点。
10楼2014-06-06 23:00:51
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