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moxiaolan33

铁虫 (小有名气)

[求助] 食用真菌,摇瓶种子液总染菌 已有5人参与

接种到发酵液之前要先确定种子液的发酵天数,因此打算测生长曲线
问题:1.大概要选择第7天的种子液接种到发酵液,因此生长曲线打算测到11天,每个做3个平行,一共要做33瓶,可是培养箱放不下那么多瓶怎么办,而且总染菌,所以总是测不出完成的生长曲线怎么办。
           2.测生长曲线是将摇的种子液是将种子液通过布氏漏斗过滤,干燥,称重,可是摇过的摇瓶壁上会有一层干物质,有的壁上多,有的壁上少,是培养基还是菌?这样称出来干重会相差较大,会不会不准?

十分困扰,测了好几个月都测不出来完整曲线,到现在也不能确定摇瓶天数,求大神帮助
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wzq_ing

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
moxiaolan33: 金币+5, 有帮助 2014-06-06 09:45:20
不知道你用多大的瓶子做的曲线,可以换小一号的瓶子做,这样看能不能放下,是在不行,可以按2楼说的,
染菌问题还是一步一步来排除,空白对照,严格消毒,无菌间,超净台什么的都处理一次,把环境影响因素排除再说,还有操作

最后看看菌种又没有问题,换一支对比
5楼2014-06-05 16:14:21
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mayborn

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dllchina: 金币+2, 鼓励应助 2014-06-06 08:11:40
moxiaolan33: 金币+5, 有帮助 2014-06-06 09:44:57
1.测量生长曲线可以分几批做,比如这次测1~5天的,总共15瓶;下次再测6~10天的。只要保证其他条件都不变,所测得的数据还是具有统计意义的。

2.按道理来说,如果发酵摇瓶摇了好多天只会有菌丝球,没有什么沉淀出现(我做的就是这样的)。另外,你测菌丝干重,可以用滤纸进行真空抽滤,烘干后计算其差值就得出你的菌丝的干重了,不会存在有什么干物质粘在内壁的现象了。
6楼2014-06-05 20:37:13
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竭泽之鱼

新虫 (小有名气)

食用真菌培养确实比较脆弱,容易染菌。建议多排除实验上自己操作的问题,至于放不下,可以从第2、3天开始,这样可以少几瓶。

[ 发自小木虫客户端 ]
11楼2014-06-06 23:42:09
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普通回帖

ahxalg3211

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2014-06-05 16:06:19
moxiaolan33: 金币+5, 有帮助 2014-06-06 09:45:58
没有做过食用菌,仅做建议:
1、条件不允许的话,先减少平行吧,看看数据的平行性再说;染菌的问题,只有自己想想可能哪个环节不严格了,灭菌、操作、设备、种子等都注意下吧。
2、不知道你的培养基有没有固形物。按照你的方法,无论瓶壁上是菌还是培养基,都应该用水洗下来,一起过滤吧。
2楼2014-06-05 12:31:19
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20093651

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2014-06-05 16:06:32
说不定不是染菌,食用菌里面也有内生菌的,可能是内生菌生长的原因
但行好事,莫问前程
3楼2014-06-05 12:44:11
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moxiaolan33

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ahxalg3211 at 2014-06-05 12:31:19
没有做过食用菌,仅做建议:
1、条件不允许的话,先减少平行吧,看看数据的平行性再说;染菌的问题,只有自己想想可能哪个环节不严格了,灭菌、操作、设备、种子等都注意下吧。
2、不知道你的培养基有没有固形物。 ...

谢谢
4楼2014-06-05 14:38:02
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moxiaolan33

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by mayborn at 2014-06-05 20:37:13
1.测量生长曲线可以分几批做,比如这次测1~5天的,总共15瓶;下次再测6~10天的。只要保证其他条件都不变,所测得的数据还是具有统计意义的。

2.按道理来说,如果发酵摇瓶摇了好多天只会有菌丝球,没有什么沉淀出 ...

谢谢
7楼2014-06-06 09:44:31
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moxiaolan33

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wzq_ing at 2014-06-05 16:14:21
不知道你用多大的瓶子做的曲线,可以换小一号的瓶子做,这样看能不能放下,是在不行,可以按2楼说的,
染菌问题还是一步一步来排除,空白对照,严格消毒,无菌间,超净台什么的都处理一次,把环境影响因素排除再说 ...

谢谢
8楼2014-06-06 09:44:44
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xqxqxhxh1

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
粘在内壁上的物质究竟是菌还是培养基, 只要随机抽几瓶, 取壁上的物质镜检一下就可以确定。控制污染的三个环节: 菌种、培养基、无菌操作均应严格无菌, 祝您成功!
自己啥都不懂
9楼2014-06-06 09:51:07
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xiaoamuchong

专家顾问 (职业作家)

科研工作者

O(∩_∩)O加油~。
曾经有人问我为什么要学微生物,我只是想离生命的本质更近一点。
10楼2014-06-06 23:00:51
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