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月牙儿-lxy

铁虫 (初入文坛)

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[交流] Waters BEH C18 交流已有5人参与

本人正在用Waters BEH C18 2.1*1.7 50mm的柱子，期间遇到各种问题，各种压力，求有同样经历的朋友，分享经验和解决问题！谢谢

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1楼 2014-06-05 08:29:21

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夏雪草1991

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我现在也马上要用这根柱子，请问要注意哪些呢？要怎么活化，然后卸柱子的时候要注意什么，平时用的时候要注意什么呢？

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2楼2015-12-30 13:00:50

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w9412

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2楼: Originally posted by 夏雪草1991 at 2015-12-30 13:00:50
我现在也马上要用这根柱子，请问要注意哪些呢？要怎么活化，然后卸柱子的时候要注意什么，平时用的时候要注意什么呢？

和一般C18无异

新柱子活化的原因是柱子保存液为异丙醇。使用一般为甲醇或乙腈，所以要置换出来。推荐先高比例甲醇或乙腈（比如60-80%）低流速（比如0.6-0.8ml/min，因为异丙醇粘度较大，流速高的话压力会比较大）冲10min左右（长了也没啥意义），然后换成低甲醇或乙腈（5-10%），流速随意（因为异丙醇已经被置换的差不多了）冲洗30min左右即可。然后可以换成你的流动相平衡之后日常检测了

卸柱子就没啥注意的了

平时使用首先保证流动相过滤、脱气，样品过滤。尽量避免柱子内部高有机相时走缓冲盐，这样会导致缓冲盐析出损坏柱子

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液相，分析纯化，多肽蛋白